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犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)操作步驟

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更新時間:2017-05-27 19:40:44瀏覽次數(shù):242次

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犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

細(xì)胞名稱     犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)操作步驟
形態(tài)特性      上皮樣;多角
生長特性     貼壁生長
特征特性      1958年,Madin SH和Darby NB從表觀正常的成年雌性科克獵犬的腎建立了MDCK細(xì)胞株。角蛋白陽性。該細(xì)胞曾被用于研究β淀粉前體蛋白的形成及其蛋白水解產(chǎn)物的分類。 
培養(yǎng)條件      DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法      1:2~1:6傳代;2~3天換液1次。
傳代情況     C5
凍存條件      基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測     培養(yǎng)法(-)
STR      -
同工酶     
染色體      76~80
使用權(quán)限     A類
犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶
G蛋白偶聯(lián)受體GPR86蛋白抗體    ,現(xiàn)貨供應(yīng),貨期短,質(zhì)量可靠。僅用于科研實(shí)驗(yàn)不應(yīng)用于臨床。我們用專業(yè)的態(tài)度,*的服務(wù),全程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。    英文名稱:    GPR86    G蛋白偶聯(lián)受體GPR86蛋白抗體    代理品牌有R&D、Santa Cruz、Bipec、Millipore等品牌,品種多達(dá)10000多種。    保存環(huán)境:2-8℃ 短期保存或<-20℃長期保存保存 1 年以上,避免反復(fù)凍融。
干擾素/維甲酸誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因抗體    ,現(xiàn)貨供應(yīng),貨期短,質(zhì)量可靠。僅用于科研實(shí)驗(yàn)不應(yīng)用于臨床。我們用專業(yè)的態(tài)度,*的服務(wù),全程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。    英文名稱:    GRIM19    干擾素/維甲酸誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因抗體    代理品牌有R&D、Santa Cruz、Bipec、Millipore等品牌,品種多達(dá)10000多種。    保存環(huán)境:2-8℃ 短期保存或<-20℃長期保存保存 1 年以上,避免反復(fù)凍融。
磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體    ,現(xiàn)貨供應(yīng),貨期短,質(zhì)量可靠。僅用于科研實(shí)驗(yàn)不應(yīng)用于臨床。我們用專業(yè)的態(tài)度,*的服務(wù),全程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。    英文名稱:    phospho-GAB2     磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體    代理品牌有R&D、Santa Cruz、Bipec、Millipore等品牌,品種多達(dá)10000多種。    保存環(huán)境:2-8℃ 短期保存或<-20℃長期保存保存 1 年以上,避免反復(fù)凍融。
多肽N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶13抗體    ,現(xiàn)貨供應(yīng),貨期短,質(zhì)量可靠。僅用于科研實(shí)驗(yàn)不應(yīng)用于臨床。我們用專業(yè)的態(tài)度,*的服務(wù),全程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。    英文名稱:    GALNT13    多肽N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶13抗體    代理品牌有R&D、Santa Cruz、Bipec、Millipore等品牌,品種多達(dá)10000多種。    保存環(huán)境:2-8℃ 短期保存或<-20℃長期保存保存 1 年以上,避免反復(fù)凍融。
銜接蛋白γ/γ1-Adaptin抗體    ,現(xiàn)貨供應(yīng),貨期短,質(zhì)量可靠。僅用于科研實(shí)驗(yàn)不應(yīng)用于臨床。我們用專業(yè)的態(tài)度,*的服務(wù),全程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。    英文名稱:    gamma Adaptin    銜接蛋白γ/γ1-Adaptin抗體    代理品牌有R&D、Santa Cruz、Bipec、Millipore等品牌,品種多達(dá)10000多種。    保存環(huán)境:2-8℃ 短期保存或<-20℃長期保存保存 1 年以上,避免反復(fù)凍融。

assembly, presumably to avoid catastrophic activation of the viral fusion peptide induced by the acidic pH of the trans-Golgi network. After cleavage by host furin, the pr peptide is released in the extracellular medium and small envelope protein M and envelope protein E homodimers are dissociated (By similarity). 
Envelope protein E binding to host cell surface receptor is followed by virus internalization through clathrin-mediated endocytosis. Envelope protein E is subsequently involved in membrane fusion between virion and host late endosomes. Synthesized as a homodimer with prM which acts as a chaperone for envelope protein 犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)操作步驟E. After cleavage of prM, envelope protein E dissociate from small envelope protein M and homodimerizes (By similarity). 
Non-structural protein 1 is involved in virus replication and regulation of the innate immune response. Soluble and membrane-associated NS1 may activate human complement and induce host vascular  

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