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豚鼠心肌細(xì)胞;GP-H1實(shí)驗(yàn)方法
細(xì)胞名稱 中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO說明書
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 1957年,Puck TT從成年中國倉鼠卵巢的活檢組織建立了CHO細(xì)胞;廣泛用于生物制品的表達(dá)。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 C7
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 38~46,63~75,部分為端著絲粒,部分為中間著絲粒
使用權(quán)限 A類
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO說明書復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO說明書細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
carcinoma, adenocarcinoma, and large cell lung cancer. NSCLC is often diagnosed at an advanced stage and has a poor prognosis.
細(xì)胞膜受體(Membrane Receptors)
EGFR-血管內(nèi)皮生長因子受體EGFR是一類分子量為170kDa的糖蛋白,在生長的細(xì)胞包括中瘤細(xì)胞中跨越細(xì)胞質(zhì)膜,表現(xiàn)有蛋白激酶活性。
EGFR是一種細(xì)胞膜受體激酶,對(duì)血管內(nèi)皮生長因子有高度的親和性,主要功能是參與血管內(nèi)皮細(xì)胞生長和血管生成的調(diào)控,主要用于各種惡性腫瘤的研究.
與其配體表皮生長因子或尿抑胃素結(jié)合后則被激活,從而啟動(dòng)DNA及蛋白質(zhì)的合成。再不進(jìn)行有絲分裂的細(xì)胞中并不存在,但在胃中例外。
大量研究報(bào)道顯示,EGFR高表達(dá)的腫瘤生存降低、轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)增高、預(yù)后不良。在很多腫瘤中都存在著EGFR表達(dá)或過度表達(dá)。這些疾病包括:結(jié)直腸癌(CRC)、頭頸部鱗狀細(xì)胞癌(SCCHN)、癌、卵巢癌、、食道癌、胰腺癌、膀胱癌、前列腺癌和非小細(xì)胞肺癌等。研究表明 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體 ,現(xiàn)貨供應(yīng),貨期短,質(zhì)量可靠。僅用于科研實(shí)驗(yàn)不應(yīng)用于臨床。我們用專業(yè)的態(tài)度,*的服務(wù),全程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。 英文名稱: ERAB 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體 代理品牌有R&D、Santa Cruz、Bipec、Millipore等品牌,品種多達(dá)10000多種。 保存環(huán)境:2-8℃ 短期保存或<-20℃長期保存保存 1 年以上,避免反復(fù)凍融。
Ephrin A2抗體 ,現(xiàn)貨供應(yīng),貨期短,質(zhì)量可靠。僅用于科研實(shí)驗(yàn)不應(yīng)用于臨床。我們用專業(yè)的態(tài)度,*的服務(wù),全程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。 英文名稱: Ephrin A2 Ephrin A2抗體 代理品牌有R&D、Santa Cruz、Bipec、Millipore等品牌,品種多達(dá)10000多種。 保存環(huán)境:2-中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO說明書8℃ 短期保存或<-20℃長期保存保存 1 年以上,避免反復(fù)凍融。
大腸埃希菌菌體蛋白抗體 ,現(xiàn)貨供應(yīng),貨期短,質(zhì)量可靠。僅用于科研實(shí)驗(yàn)不應(yīng)用于臨床。我們用專業(yè)的態(tài)度,*的服務(wù),全程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。 英文名稱: E.coli 大腸埃希菌菌體蛋白抗體 代理品牌有R&D、Santa Cruz、Bipec、Millipore等品牌,品種多達(dá)10000多種。 保存環(huán)境:2-8℃ 短期保存或<-20℃長期保存保存 1 年以上,避免反復(fù)凍融。
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