當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T玉米內(nèi)源基因IVR熒光-PCR法檢測試劑盒
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:玉米內(nèi)源基因IVR熒光-PCR法檢測試劑盒
產(chǎn)品分類:熒光-PCR法
貨號:CP100016
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
104227-87-4 Famciclovir 50mg Porcine Torque Teno Virus(PTTV)豬細環(huán)病毒PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負20度
10423-37-7 Citenamide (AY-15613) 10mg Ostreid Herpesvirus Type 1(OsHV-1)牡蠣皰疹病毒1型PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負20度
10423-37-7 Citenamide (AY-15613) 1mg Ostreid Herpesvirus Type 1(OsHV-1)牡蠣皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負20度
10423-37-7 Citenamide (AY-15613) 20mg Ostreid herpesvirus(OsHV)牡蠣皰疹病毒LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負20度
10423-37-7 Citenamide (AY-15613) 5mg Ostreid Herpesvirus Type 1(OsHV-1)牡蠣皰疹病毒1型染料法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負20度
硬脂酸單甘油酯(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRGMS, glycerol monostearate 人酰化刺激蛋白(ASP)ELISA檢測試劑盒HumanAcylationStimulatingProtein,ASPELISAKit 96T/48T HumanclusterOfdiffereiation,CD4ELISA試劑盒人CD4分子(CD4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氯化金質(zhì)量規(guī)格:BCGold (III) chloride tetrahydrate 大鼠前列腺素E2(PGE2)試劑盒 Rat Prostaglandin E2,PGE2 ELISA Kit Humanepidemicparotitis,EPELISAKit人流行性腮腺炎(EP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羥基脲質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRHydroxyurea/Hydroxycarbamide 英文名稱RatTG-AbELISAKit大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(TG-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 牛皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
羥基脲(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Hydroxyurea/Hydroxycarbamide 膠原酶潛酶活化劑(APMA)500微升 人自然抗性相關巨噬細胞蛋白1(AMP-1)試劑盒 Human natural resistance-associated macrophage protein 1,AMP-1 ELISA kit
玉米內(nèi)源基因IVR熒光-PCR法檢測試劑盒大鼠肺細胞;WL1霉酚酸; 麥考酚酸;MPA質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMycophenolic acid
TFPI2 Others Mouse 小鼠 TFPI2 / PP5 人細胞裂解液 (陽性對照) 霉酚酸; 麥考酚酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標準品Mycophenolic acid
KU812 人外周血嗜堿性白血病細胞鹽酸甲哌卡因質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRMepivacaine HCl
MS751人頸表皮癌細胞 MS751 human cervical epidermoid carcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS安普那韋 質(zhì)量規(guī)格:>97%Amprenavir
HGF Protein Mouse 重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白魯比替康; 9-硝基喜樹堿質(zhì)量規(guī)格:>99%Rubitecan
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
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