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上海莼試生物技術有限公司
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當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 48T 0.2PCR管志賀氏菌PCR-熒光探針法檢測試劑盒

志賀氏菌PCR-熒光探針法檢測試劑盒

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號48T 0.2PCR管

品       牌

廠商性質經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-07-30 15:44:53瀏覽次數(shù):135次

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志賀氏菌PCR-熒光探針法檢測試劑盒客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品特點:

高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:志賀氏菌PCR-熒光探針法檢測試劑盒
產(chǎn)品分類:PCR-熒光探針法
貨號:CP100302
產(chǎn)品規(guī)格:48T   0.2PCR
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20保存
產(chǎn)品有效期:一年儲存條件:
14
或-20樣品收集、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.
血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3.
細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5.
保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix 
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
 2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl      
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s →58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 保溫7min
注意事項:
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1.
標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2
2.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3.
7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6.
重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7.
用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8.
如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9.
如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。

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脂酰布洛芬-β-D-葡萄糖苷酸質量規(guī)格:美國進口Ibuprofen Acyl-β-D-glucuronide   大鼠角化細胞因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISA檢測試劑盒Ratkeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit 96T/48T  Humangranulocytechemotacticprotein-2,GCP-2ELISA試劑盒人粒細胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

外消旋2-羥基布洛芬質量規(guī)格:美國進口rac 2-Hydroxy Ibuprofen  SHC轉化蛋白1(SHC1)試劑盒 Human SHC1 ELISA Kit  HumanLactoferrinaibodyIgG,LF/LTFAb-IgGELISAKit人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

1-羥基布洛芬(布洛芬雜質))(非對映)質量規(guī)格:美國進口1-Hydroxy Ibuprofen (Ibuprofen Impurity L)(Mixture of Diastereomers)  英文名稱MouseVIII-AgELISAKit小鼠凝血因子VIII相關抗原(VIII-Ag)規(guī)格:96T/48T  大鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)ELISA試劑盒 ,英文名: REG-1a ELISA Kit

1-含氧的布洛芬質量規(guī)格:美國進口1-Oxo Ibuprofen  VZV(VARICELLAZOSTER)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒人酶(CA)ELISA檢測試劑盒Humancarbonicanhydrase,CAELISAKit 96T/48T
志賀氏菌PCR-熒光探針法檢測試劑盒綠色熒光蛋白標記人胃癌細胞;MGC803-GFP1酸三丁酯(CP)Tributyl phosphate質量規(guī)格:CP

786-O細胞,人腎透明細胞腺癌細胞 小鼠結腸癌細胞,CMT93細胞 CL-0202Saos-2(人骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×21酸三丁酯(標準品)Tributyl phosphate質量規(guī)格:分析標準品

VCaP(人前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×23-O-β-D-葡萄糖( 14)-[ a -L-鼠李糖(12)]- a-L-阿拉伯糖 常春藤配基- 28-O-鼠李糖(14)葡萄糖(16)葡萄糖苷V質量規(guī)格:HPLC98%,標準品

NHEM.f-c M2 正常人表皮素細胞(NHEM)少年,M2培養(yǎng)液中培養(yǎng) 500,000cells 視網(wǎng)膜微血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)D-果糖-6-1酸二鈉鹽D-Fructose-6-phosphate di salt質量規(guī)格:>95%,BR

虹膜色素上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)白頭翁皂苷BPulchinenoside B質量規(guī)格:HPLC98%,標準品


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