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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測(cè)試劑盒>>RNA/DNA提取>> 250 mL10×TBE Buffer

10×TBE Buffer

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)250 mL

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-08-02 08:37:16瀏覽次數(shù):141次

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10×TBE Buffer客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1.
特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   
優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6.   
優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。

產(chǎn)品名稱

10×TBE Buffer

規(guī)格

250 mL

貨號(hào)

CP100400

具有下列特點(diǎn):
1.
即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2.
引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix
中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4.
提供陽性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。
其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93-94)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?/span>5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

一次性濾器(Pall,0.22μm,水系)5-Benzimidazolecarboxylic acid1578865-苯并咪唑甲酸

一次性濾器(直徑13mm,0.45um,水系,PES膜,獨(dú)立包裝)個(gè)/ 0Benzoin isopropyl ether66528安息香

一次性濾器(直徑25mm,0.22um,水系,PES膜,獨(dú)立包裝)個(gè)/ 3m-Anisic acid5868間茴香酸

一次性細(xì)胞篩2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate9二乙基二硫代氨基甲酸 2-苯并噻唑酯

一次性研磨杵根/ p-Anisoin1192對(duì)茴香偶姻
植物維生素B6(VB6)ELISA試劑盒     Trimethoprim  中文名:甲氧芐啶  分子式:C14H18N4O3 

植物維生素B6(VB6)ELISAKit                 Trillin  14144-06-0  中文名:延齡草苷  分子式:C33H52O8 

植物維生素B12elisa試劑盒   植物維生素B12試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   植物維生素B12試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:植物維生素B12試劑盒、植物維生素B12eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。  Testosterone    中文名:  分子式:C19H28O2  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

植物維生素B12(VB12)ELISA試劑盒     Trimethoprim  738-70-5  中文名:甲氧芐啶  分子式:C14H18N4O3  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

植物維生素B12(VB12)ELISAKit     Troxerutin  7085-55-4  中文名:曲克蘆丁  分子式:C33H42O19  度:98.0%  關(guān)鍵詞:
10×TBE Buffer
黃腐酚 HPLC98% 20mg 人軍團(tuán)菌抗體IgM(LP Ab-IgM)試劑盒 Human Legionella aibody IgM,LP Ab-IgM ELISA Kit

黃花敗醬甙C HPLC98% 5mg RatActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule,ALCAMELISAKit大鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

黃決明素 HPLC98% 20mg 載玻片細(xì)胞RHO蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20

黃連堿 HPLC98% 20mg Monkeyβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISA試劑盒猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

 HPLC98% 20mg 小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶關(guān)聯(lián)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒 ,英文名: NGAL ELISA Kit

黃芪多糖 鑒別 20mg 犬細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA檢測(cè)試劑盒Canineiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1/CD54ELISAKit 96T/48T

黃芪黃酮 鑒別 20mg 犬神經(jīng)型合成酶(nNOS)試劑盒 Canine Neuronal Niic Oxide Syhase,nNOS ELISA Kit

黃芪甲苷 HPLC98% 20mg 英文名稱HumanProgesteroneELISAkit人孕激素(Progesterone)規(guī)格:96T/48T

黃芪皂苷I HPLC98% 10mg 蟲卵細(xì)胞活力和死亡體外裂卵(invioexcystation)定量檢測(cè)試劑盒20

黃芪皂苷II HPLC98% 20mg Ratheatshockprotein,HSP47ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白47(HSP47)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
兩相分離 1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,47000rpm離心5分鐘。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。


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