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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測(cè)試劑盒>>RNA/DNA提取>> Glycine-NaOH Buffer
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):Glycine-NaOH Buffer
產(chǎn)品分類(lèi):RNA/DNA提取試劑盒
貨號(hào):CP100674
產(chǎn)品規(guī)格:詳見(jiàn)說(shuō)明
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。
氨芐青霉素ELISA試劑盒96TN-Acetyl-L-tryptophan12184N-乙酰-L-色氨酸
硝基呋喃 ELISA試劑盒96TN-Acetyl-D-tryptophan22/1/5N-乙酰基-D-色氨酸
倍他米松 ELISA試劑盒96TN-Acetylcaprolactam18881N-乙酰己內(nèi)酰胺
納他霉素 ELISA試劑盒96TN-Acetyl-hydroxytryptamine123N-乙?;?/span>-羥基色胺
展青霉素 ELISA試劑盒96TN-Acetyl-piperidone321616N-乙酰基-酮
小鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子 英文名稱(chēng): Mouse Connective Tissue Growth Factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): CTGF Cialis 171596-29-5 分子式:C22H19N3O4
小鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒 Dronedarone 141625-93-6 中文名:鹽酸決奈達(dá)隆 分子式:C31H45ClN2O5S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA試劑盒 Dronedarone 141625-93-6 中文名:鹽酸決奈達(dá)隆 分子式:C31H45ClN2O5S
小鼠角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)ELISA試劑盒 Drevogenin A 中文名: 分子式:C28H42O7 度:%
小鼠角化細(xì)胞因子elisa試劑盒 小鼠角化細(xì)胞因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠角化細(xì)胞因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠角化細(xì)胞因子試劑盒、小鼠角化細(xì)胞因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 D-Tryptophan methyl ester 中文名: 分子式:C12H15ClN2O2
Glycine-NaOH Buffer茯苓新酸A HPLC≥98% 20mg 牛銅藍(lán)蛋白(CP)試劑盒 Bovine Ceruloplasmin,CP ELISA Kit
,去氫苦參堿 HPLC≥95% 20mg 英文名稱(chēng)HumanconnectivetissuegrowthfactorELISAKit人結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(ctgf)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
槐苦參醇,槐醇 HPLC≥95% 20mg 調(diào)料L-乳酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20
環(huán)氧五味子丙素 HPLC≥95% 20mg RatPhospholipidaseA2,PL-A2ELISA試劑盒大鼠0脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
異性南五味子乙素; 異南五味子素 B HPLC≥95% 20mg 小鼠維生素B6(VB6)ELISA試劑盒 ,英文名: VB6 ELISA Kit
柯楠因 HPLC≥95% 20mg 小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit 96T/48T
二氫柯楠因 HPLC≥95% 20mg 人果糖二0酸縮酶A(ALDOA)試劑盒 Human ALDOA ELISA kit
腰果酚(C:) HPLC≥95% 20mg Ratendotoxin,ETELISAKit大鼠內(nèi)(ET)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
松葉菊酮堿 HPLC≥95% 20mg 5’末端DNA探針同位素([γ32P]ATP)激酶標(biāo)記試劑盒20
丹參螺縮酮內(nèi)酯,丹參隱螺內(nèi)酯 HPLC≥95% 20mg MouseFactor-relatedApoptosis,FASELISA試劑盒小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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