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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>ATCC細(xì)胞>>小鼠源細(xì)胞>> 雜交瘤(B類);C3110D2B2操作步驟
雜交瘤細(xì)胞株;1H7F8實(shí)驗(yàn)方法
公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
細(xì)胞名稱 雜交瘤(B類);C3110D2B2操作步驟
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體;凍存前做支原體去除
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 保持細(xì)胞密度在1×105~1×106 cells/ml之間,每周換液2~3次
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
雜交瘤(B類);C3110D2B2操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
雜交瘤(B類);C3110D2B2操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
雞馬立克氏病病毒(MDV)抗體(IgM)免疫試劑盒 Chicken marek's disease virus(MDV)antibody(IgM)ELISA kit
雞粒細(xì)胞集落刺激因子受體(G-CSFR)免疫試劑盒 Chicken granulocyte colony-stimulating factor receptor,G-CSFR ELISA Kit
雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)免疫試劑盒 Chicken soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit
雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)免疫試劑盒 Chicken Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1 ELISA Kit
雞可溶性E選擇素(sE-selectin)免疫試劑盒 Chicken soluble E-selectin,sE-selectin ELISA Kit
雞抗人IgM antibody 免疫試劑盒 Chicken anti-human IgM antibody ELISA kit
雞抗人IgG antibody 免疫試劑盒 Chicken anti-human IgG antibody ELISA kit
雞抗人IgA antibody 免疫試劑盒 Chicken anti-human IgA antibody ELISA kit
雞抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)抗體免疫試劑盒 Chicken Anti-Thrombin Ⅲ antibody,AT-Ⅲ Ab ELISA Kit
雞抗鏈球菌溶血素O(ASO)抗體(IgM)免疫試劑盒 Chicken anti-streptolysin O(ASO)antibody(IgM)ELISA Kit
雞抗鏈球菌溶血素O(ASO)抗體(IgG)免疫試劑盒 Chicken anti-streptolysin O(ASO)antibody(IgG)ELISA Kit
端粒重復(fù)結(jié)合因子2(TERF2)ELISA試劑盒 ,英文名: TERF2 ELISA Kit
動(dòng)力蛋白激活蛋白4(DCTN4)ELISA試劑盒 ,英文名: DCTN4 ELISA Kit
動(dòng)力蛋白激活蛋白3(DCTN3)ELISA試劑盒 ,英文名: DCTN3 ELISA Kit
淀粉酶α(Amyα)ELISA試劑盒 ,英文名: Amyα ELISA Kit
電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFβ)ELISA試劑盒 ,英文名: ETFβ ELISA Kit
電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白α肽(ETFα)ELISA試劑盒 ,英文名: ETFα ELISA Kit
電子傳遞黃素蛋白脫氫酶(ETFDH)ELISA試劑盒 ,英文名: ETFDH ELISA Kit
電壓依賴性陰離子通道蛋白1(VDAC1)ELISA試劑盒 ,英文名: VDAC1 ELISA Kit
雜交瘤(B類);C3110D2B2操作步驟電碳酸氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(NBC4)ELISA試劑盒 ,英文名: NBC4 ELISA Kit
地塞米松誘導(dǎo)蛋白(DEXI)ELISA試劑盒 ,英文名: DEXI ELISA Kit
抵抗素樣蛋白β(RETNLβ)ELISA試劑盒 ,英文名: RETNLβ ELISA Kit
低氧誘導(dǎo)因子2α(HIF2α)ELISA試劑盒 ,英文名: HIF2α ELISA Kit
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