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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測(cè)試劑盒>>RNA/DNA提取>> DNA電泳液分子量標(biāo)準(zhǔn)B
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
產(chǎn)品名稱 | DNA電泳液分子量標(biāo)準(zhǔn)B |
規(guī)格 | 詳見說明 |
貨號(hào) | CP100761 |
具有下列特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。
其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?/span>5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Glycogen Type II 糖原II型 1g 17α-Neriifolin441
GMP 5’-單磷酸鳥苷二鈉鹽水合物 0mg17α-Estradiol57117α-雌二醇
GTP 5’-三磷酸鳥苷鈉鹽 25mg17-Hydroxya,2a-methylenepregna,6-diene,-dione acetate2
Guanine 鳥嘌呤 5g17-Ethylendioxyandrosta,4-dien-one2398317-亞乙二氧基-雄,4-二烯-酮
Guanosine 鳥苷;鳥嘌呤核苷 5g17-Acetyloxy-chloroα-chloromethylpregna,6-diene,-dione171838醋酸環(huán)丙氯地孕酮
小鼠促上腺皮質(zhì)激素 英文名稱: Adrenocor Ticoopic Hormore 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ACTH Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate 98475-07-1 中文名: 分子式:Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素elisa試劑盒 小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒、小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Epigoitrin 1072-93-1 中文名:表告依春 分子式:C5H7NOS
小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISAKit N6-Benzoyladenine 4005-49-6 中文名:N6-苯甲酰基腺嘌呤 分子式:C12H9N5O 度:98.0%
小鼠促卵泡素elisa試劑盒 小鼠促卵泡素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠促卵泡素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠促卵泡素試劑盒、小鼠促卵泡素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Cyasterone 中文名:杯莧甾酮 分子式:C29H44O8 度:99.0%
小鼠促卵泡素(mouse FSH) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Fludarabine 21679-14-1 中文名:氟達(dá)拉賓 分子式:C10H12FN5O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
DNA電泳液分子量標(biāo)準(zhǔn)B吲達(dá)帕胺 Indapamide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP6.0,BR 人α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)試劑盒 Human α-SMA ELISA Kit
吲達(dá)帕胺(標(biāo)準(zhǔn)品) Indapamide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱MouseICAM-2/sCD102ELISAKit小鼠細(xì)胞間粘附分子-2(ICAM-2/sCD102)規(guī)格:96T/48T
帕醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Iopamidol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,USP SiRNA大量SperfusinX脂質(zhì)體細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒10
帕醇 Iopamidol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP rabbitImmunoglobulinA,IgAELISA試劑盒兔子球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸洛哌丁胺 Loperamide HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠酸激酶(PK)ELISA 試劑盒
鹽酸洛哌丁胺(標(biāo)準(zhǔn)品) Loperamide HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Rat hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 大鼠輕化1(HYD)ELISA試劑盒
酮咯酸氨丁三醇 Ketorolac Tromethamine 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP,BR HumanHexokinase,HKELISAKit 人己糖激酶(HK)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
酮咯酸氨丁三醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Ketorolac Tromethamine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISA試劑盒人骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蘭索拉唑 Lansoprazole 質(zhì)量規(guī)格:干品含量>98%,USP32 植物組織可溶性總蛋白制備試劑盒20
蘭索拉唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Lansoprazole 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 HumanSS-B/LaAibody,ELISAKit人抗SS-B/La抗體ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
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