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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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人肝癌亞力山大細(xì)胞;PLC/PRF/5操作步驟

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人肝癌亞力山大細(xì)胞;PLC/PRF/5操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

細(xì)胞名稱     人肝癌亞力山大細(xì)胞;PLC/PRF/5操作步驟
形態(tài)特性      上皮細(xì)胞
生長特性     貼壁生長
特征特性      該細(xì)胞系分泌乙肝病毒表面抗原(HBsAg)。 此細(xì)胞系原先被支原體污染,后用BM-cycline去除支原體。 
培養(yǎng)條件      MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法      消化5-10分鐘。1:2。3-4天長滿。
傳代情況     P(78+5)
凍存條件      基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測     陰性
STR      Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:11,12;D16S539:13;D18S51:17;D19S433:11,13;D21S11:30,33.2;D2S1338:19,22;D3S1358:15;D5S818:12;D7S820:9,11;D8S1179:13,16;FGA:19.2,25;TH01:8;TPOX:8;vWA:15,16
同工酶     
染色體     
使用權(quán)限     A類
人肝癌亞力山大細(xì)胞;PLC/PRF/5操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
人肝癌亞力山大細(xì)胞;PLC/PRF/5操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
人幾丁質(zhì)酶1(殼三糖酶)(CHIT1)免疫試劑盒    Human chitinase 1 (chitotriosidase),CHIT1 ELISA kit
人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)免疫試劑盒    human collectin sub-family member 11,COLEC11 ELISA Kit
人極低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒    Human very low density lipoprotein,VLDL ELISA Kit
人激肽釋放酶8(KLK 8)免疫試劑盒    Human Kallikrein 8,KLK 8 ELISA Kit
人激肽釋放酶7(KLK 7)免疫試劑盒    Human Kallikrein 7,KLK 7 ELISA Kit
人激肽釋放酶6(KLK 6)免疫試劑盒    Human Kallikrein 6,KLK 6 ELISA Kit
人激肽釋放酶2(hK 2)免疫試劑盒    Human Kallikrein 2,hK 2 ELISA Kit
人激肽釋放酶11(KLK 11)免疫試劑盒    Human Kallikrein 11,KLK 11 ELISA Kit
人激肽釋放酶10(KLK 10)免疫試劑盒    Human Kallikrein 10,KLK 10 ELISA Kit
人激肽釋放酶1(KLK 1)免疫試劑盒    Human Kallikrein 1,KLK 1 ELISA Kit
人激素敏感性脂肪酶(HSL)免疫試劑盒    Human hormone sensitive lipase,HSL ELISA Kit

神經(jīng)秩蛋白(NRTN)ELISA試劑盒    ,英文名:    NRTN ELISA Kit
神經(jīng)正五聚蛋白受體(NPTXR)ELISA試劑盒    ,英文名:    NPTXR ELISA Kit
神經(jīng)源性絲氨酸蛋白酶抑制劑(NSP)ELISA試劑盒    ,英文名:    NSP ELISA Kit
神經(jīng)源性分化蛋白6(NEUROD6)ELISA試劑盒    ,英文名:    NEUROD6 ELISA Kit
神經(jīng)源性分化蛋白4(NEUROD4)ELISA試劑盒    ,英文名:    NEUROD4 ELISA Kit
神經(jīng)源性分化蛋白2(NEUROD2)ELISA試劑盒    ,英文名:    NEUROD2 ELISA Kit
人肝癌亞力山大細(xì)胞;PLC/PRF/5操作步驟神經(jīng)源性分化蛋白1(NEUROD1)ELISA試劑盒    ,英文名:    NEUROD1 ELISA Kit
神經(jīng)源素3(NEUROG3)ELISA試劑盒    ,英文名:    NEUROG3 ELISA Kit
神經(jīng)源素2(NEUROG2)ELISA試劑盒    ,英文名:    NEUROG2 ELISA Kit
神經(jīng)源素1(NEUROG1)ELISA試劑盒    ,英文名:    NEUROG1 ELISA Kit
神經(jīng)元正五聚蛋白Ⅱ(NPTX2)ELISA試劑盒    ,英文名:    NPTX2 ELISA Kit

 

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