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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>RNA/DNA提取>> 探針標記專用PCR Mix

探針標記專用PCR Mix

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-08-05 16:31:45瀏覽次數(shù):128次

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探針標記專用PCR Mix運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區(qū)域操作。

產(chǎn)品特點:

高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:探針標記專用PCR Mix
產(chǎn)品分類:RNA/DNA提取試劑盒
貨號:CP100864
產(chǎn)品規(guī)格:詳見說明
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20保存
產(chǎn)品有效期:一年儲存條件:
14
或-20樣品收集、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.
血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3.
細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5.
保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix 
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
 2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl      
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s →58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 保溫7min。
注意事項:
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1.
標記 6 個離心管,分別為 7,65,43,2。
2.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3.
7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7.
用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8.
如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9.
如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標記 N+9 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標記 N+4 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。

15ml有機玻璃離心管架15ml有機玻璃離心管架N-Benzoyl-leucine179667N-苯甲酰基-亮氨酸

16cm剪刀16cmN6-Benzoyladenine059N6-苯甲?;汆堰?/span>

1L 塑料燒杯 藍標1L Betamipron348倍他米隆

1ml比色皿6-Benzyloxypurine576-芐氧基嘌呤

0ml玻璃瓶0ml(S)-Benzyl-oxazolidinone7192(S)-芐基-噁唑烷酮
細菌營養(yǎng)肉湯500毫升  2-Acetamidothiazole  2719-23-5  中文名:2-乙酰氨基噻唑  分子式:C5H6N2OS  度:99.0%  關(guān)鍵詞: 

細菌營養(yǎng)瓊脂平板50  2-Acetyl-3-ethylpyrazine  32974-92-8  中文名:2-乙?;?/span>-3-乙基吡嗪  分子式:C8H10N2O  度:99.0%  關(guān)鍵詞: 

細菌印度墨負性染色試劑盒50  2-Acetylfluorene  781-73-7  中文名:2-乙酰芴  分子式:C15H12O  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

細菌異化型鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒20  2-Amino-2'-chloro-5-nitro benzophenone  2011-66-7  中文名:2-氨基-5-硝基-2'-氯二苯甲酮  分子式:C13H9ClN2O3  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

細菌乙酰原醇V-P檢測試劑盒20  2-Amino-3-chloro-1,4-naphthoquinone  2797-51-5  中文名:2-氨基-3--1,4-萘醌  分子式:C10H6ClNO2  度:99.0%  關(guān)鍵詞:
探針標記專用PCR Mix聚乙二醇8000  PEG 8000  質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學級 小鼠S100蛋白(S-100)ELISA檢測試劑盒MouseSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 96T/48T

氯化鋰(分子生物學級)  Lithium chloride  質(zhì)量規(guī)格:>98% 人分泌成分(SC)試劑盒 Human secretory compone,SC ELISA Kit

硫酸亞鐵銨六水  Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR RatLactoferrin,LTF/LFELISAKit大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

紅四氮唑  TTC,TTZ,Tetrazolium Red  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR ChusN6*培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑

磺胺甲氧噠嗪  Sulfamethoxypyridazine  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Mousemucin-5subtypeB,MUC5BELISA試劑盒小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

磺胺甲氧噠嗪(標準品)  Sulfamethoxypyridazine  質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)ELISA試劑盒 ,英文名: CO ELISA Kit

TCEP;三-(2-甲酰乙基)膦鹽酸鹽  TCEP;   質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA檢測試劑盒MousesolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 96T/48T

硫代硫酸鈉五水(AR)   thiosulfate, pentahydrate  質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 人肺炎支原體抗體(MP-Ab)試劑盒 Human Mycoplasma pneumoniae aibody,MP-Ab ELISA Kit

化鈉(AR)   iodide  質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,AR RatLaminin,LNELISAKit大鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

可溶性淀粉  Starch soluble  質(zhì)量規(guī)格:BR Chymoypsin


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