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注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:PCR級MgSO4溶液
產(chǎn)品分類:RNA/DNA提取試劑盒
貨號:CP100863
產(chǎn)品規(guī)格:詳見說明
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
1kb DNA ladder(000000bp) 0次8-Aminoquinoline57868-氨基
1kb plus DNA ladder(00000bp) 0次8-Amino-naphthalenesulfonic acid11988-氨基-萘磺酸
0bp DNA ladder(0000bp) 0次8-Amino-methylquinoline1897888-氨基-
2bp DNA ladder(2000bp) 0次8,14-Epoxyergosta,22-diene,6-dione1265
0bp DNA ladder(0000bp) 0次7α-Methoxyα,6α-epoxyergosta(14),22-dienβ-ol174419
細菌總ATP酶(totalATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20次 2,2'-Dithiobisbenzanilide 135-57-9 中文名:2,2'-二苯甲酰氨基二苯二硫 分子式:C26H20N2O2S2 度:98.0%
細菌茁糖酵解溴百里酚藍(BTB)瓊脂平板50個 2',3'-Di-O-acetyl-5'-deoxy-5-fluorocytidine 中文名: 分子式:C13H16FN3O6 度:98.0%
細菌茁糖酵解酚紅瓊脂平板50個 2,4-Dihydroxypyridine 中文名: 分子式:C5H5NO2 度:98.0%
細菌脂肪酶(LIPASE)活性定性染色試劑盒20次 20-Hydroxyecdysone 5289-74-7 中文名:20-羥基蛻皮甾酮 分子式:C27H44O7 度:98.0% 關鍵詞: 抗炎; 抗心律失常; 抗?jié)?/span>; 蛻皮甾; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
細菌脂肪酶(LIPASE)活性比色法定量檢測試劑盒20次 22-Dehydroclerosterol glucoside 143815-99-0 中文名: 分子式:C35H56O6 度:% 關鍵詞: 抗肝毒; 豆甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
PCR級MgSO4溶液乙酸銨(分子生物學級) Ammonium acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學級 RatLactateDehydrogenase,LDHELISAKit大鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
微晶纖維素(100 um) Cellulose, Microcrystalline 質(zhì)量規(guī)格:BR,100 um Chu’sN6基礎培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
乳糖;α-乳糖,一水 alpha-Lactose, monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:BR Mousemucin-5subtypeB,MUC5BELISA試劑盒小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氯化鈣二水 Calcium chloride, dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 小鼠平滑肌肌動蛋白α2(ACTα2)ELISA試劑盒 ,英文名: ACTα2 ELISA Kit
乙二醇 Ethylene glycol 質(zhì)量規(guī)格:BR 人乙酰膽堿(ACH)ELISA檢測試劑盒Humanacetylcholine,ACHELISAKit 96T/48T
硫酸鎂七水(分子生物學級) Magnesium sulfate, heptahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物 大鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)試劑盒 Rat Mucin-5 subtype AC,MUC5AC ELISA Kit
糖化酶;葡萄糖淀粉酶 Glucozyme 質(zhì)量規(guī)格:BR,10萬u/G 英文名稱HumanFractalkineELISAKit人Fractalkine規(guī)格:96T/48T
聚乙二醇4000 PEG 4000 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 動物組織銅ATP酶(Cu++-ATPase)活性比色法量檢測試劑盒20
無水氫二鉀 Potassium phosphate, dibasic, anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR ELISAKiths-CRP兔超敏C反應蛋白規(guī)格:48T/96T
甲酰胺 Formamide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 小鼠嘌呤核苷酸0酸化酶(PNP)ELISA試劑盒 ,英文名: PNP ELISA Kit
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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