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人腎透明細(xì)胞癌;Caki-1操作步驟

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更新時(shí)間:2017-05-16 23:29:33瀏覽次數(shù):176次

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細(xì)胞名稱     人腎透明細(xì)胞癌;Caki-1操作步驟
形態(tài)特性      上皮樣
生長(zhǎng)特性     貼壁生長(zhǎng)
特征特性      該細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)中包含許多微絨毛、少許微絲、許多小線粒體、發(fā)達(dá)的高爾基休和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、許多脂滴和多層體、次級(jí)溶酶體,沒有發(fā)現(xiàn)病毒顆粒。 
培養(yǎng)條件      McCoy's 5A Media (Modified with Tricine)  10%FBS
傳代方法      1:2~1:4傳代;每周換液2~3次。
傳代情況     C3
凍存條件      基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)     培養(yǎng)法(-)
STR      Amelogenin:X;CSF1PO:10,11;D13S317:11,12;D16S539:12;D18S51:14;D19S433:14;D21S11:28,30;D2S1338:17,19;D3S1358:17;D5S818:11,12;D7S820:8,12;D8S1179:12,14;FGA:26;TH01:6,8;TPOX:8,11;vWA:15,17;
同工酶     
染色體     
使用權(quán)限     A類
人腎透明細(xì)胞癌;Caki-1操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
人腎透明細(xì)胞癌;Caki-1操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
人胎球蛋白A(Fetuin A)免疫試劑盒    Human Fetuin A ELISA Kit
人胎盤生長(zhǎng)因子(PLGF)免疫試劑盒    Human PLGF ELISA kit
人胎盤堿性磷酸酶(PLAP)免疫試劑盒    Human Placental alkaline pkosphatase,PLAP ELISA Kit
人胎盤蛋白13(PP13)免疫試劑盒    Human placental protein 13,PP13 ELISA Kit
人胎盤催乳素(HPL)免疫試劑盒    Human placenta lactogen,HPL ELISA Kit
人胎兒血紅蛋白(HBF)免疫試劑盒    Human fetal hemoglobin,HBF ELISA Kit
人胎兒纖連蛋白(fFN)免疫試劑盒    Human fetal Fibronectin,fFN ELISA Kit
人鎖鏈素(DES)免疫試劑盒    Human desmosine,DES ELISA Kit
人羧甲基賴氨酸(CML)免疫試劑盒    Human Carboxymethyl lysine,CML ELISA Kit
人羧化基質(zhì)谷氨酸蛋白(ucMGP)免疫試劑盒    Human undercarboxylated matrix Gla protein,ucMGP ELISA kit
人羧化不全骨鈣素(ucOC)免疫試劑盒    Human Undercarboxylated Osteocalcin,ucOC ELISA Kit
人髓樣分化因子88(MyD88)免疫試劑盒    Human MyD88 ELISA Kit
人髓性細(xì)胞核分化抗原(MNDA)免疫試劑盒    human MNDA ELISA Kit

乙酰輔酶A乙酰轉(zhuǎn)移酶2(ACAT2)ELISA試劑盒    ,英文名:    ACAT2 ELISA Kit
乙酰輔酶A(A-CoA)ELISA試劑盒    ,英文名:    A-CoA ELISA Kit
乙酰膽堿酯酶關(guān)聯(lián)蛋白(ACHAP)ELISA試劑盒    ,英文名:    ACHAP ELISA Kit
乙醛氧化酶1(AOX1)ELISA試劑盒    ,英文名:    AOX1 ELISA Kit
乙基丙二酸腦病變基因1(ETHE1)ELISA試劑盒    ,英文名:    ETHE1 ELISA Kit
乙二醛酶Ⅰ(GLO1)ELISA試劑盒    ,英文名:    GLO1 ELISA Kit
乙醇脫氫酶7(ADH7)ELISA試劑盒    ,英文名:    ADH7 ELISA Kit
乙醇脫氫酶6(ADH6)ELISA試劑盒    ,英文名:    ADH6 ELISA Kit
人腎透明細(xì)胞癌;Caki-1操作步驟乙醇脫氫酶5(ADH5)ELISA試劑盒    ,英文名:    ADH5 ELISA Kit
乙醇脫氫酶4(ADH4)ELISA試劑盒    ,英文名:    ADH4 ELISA Kit
乙醇脫氫酶3(ADH3)ELISA試劑盒    ,英文名:    ADH3 ELISA Kit
乙醇脫氫酶2(ADH2)ELISA試劑盒    ,英文名:    ADH2 ELISA Kit

 

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