產(chǎn)品特點：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：羊肺腺瘤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品分類：熒光定量PCR
貨號：CP100990
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。

無水硫酸鈉(分析標(biāo)準(zhǔn)品,pestizides≤1 ppm)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,pestizides≤1 ppm sulfate anhydrous  PorcineIerleukin1β,IL-1βELISA試劑盒豬白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  紐蛋白(VCL)ELISA試劑盒 ，英文名： VCL ELISA Kit

甲嘧磺隆(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Sulfometuron-methyl  小鼠骨成型蛋白15(BMP-15)ELISA試劑盒 ，英文名： BMP-15 ELISA Kit  rabbitneuroophin4,-4ELISA試劑盒兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

西草凈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%Simetryne  大鼠(EPI)ELISA檢測試劑盒RatEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit 96T/48T  HumanAquaporin1,AQP-1ELISA試劑盒人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

喹禾靈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,96%)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,96%Quizalofop-ethyl  人百日咳病毒抗體(IgA)試劑盒 Human bordetella peussis aibody IgA ELISA kit  HumanCompleme1inhibitoraoaibody,C1INHELISAKit人補體1抑制物抗體(C1INH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
十一烷(standard for GC,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99.5%(GC)Undecane  HumanSolubleAdenylateCyclase,sACELISAKit人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  大鼠白三烯B4(LTB4)試劑盒 Rat Leukoiene B4,LT-B4 ELISA Kit

1,1-環(huán)己基二乙酸質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRCDA, 1,1-Cyclohexanediacetic acid  小鼠白介素17F(IL17F)ELISA試劑盒 ，英文名： IL17F ELISA Kit  CLIAKitfoH(Humayrosinehydroxylase)ELISAKit人酪氨酸羥化酶規(guī)格：48T/96T

乙酸纖維素質(zhì)量規(guī)格：BRCellulose acetate  人前列腺素F(PGF)ELISA檢測試劑盒humanProstaglandinF,PG-FELISAKit 96T/48T  全組織酸性1酸酶活性染色試劑盒10

乙酸鈰(>99%，BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%，BRCerium(III) acetate hydrate  大鼠精氨酸(Arg)試劑盒 Rat arginine,Arg ELISA kit  ELISAKitTA人抗1壁酸抗體規(guī)格：48T/96T
羊肺腺瘤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒A型流感病毒通用型熒光-PCR法檢測試劑盒

豬細小病毒(PPV)熒光-PCR法檢測試劑盒

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