當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>ATCC細胞>>轉(zhuǎn)化細胞>> EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0907操作步驟
細胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0907操作步驟
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一無精癥男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0907操作步驟復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內(nèi)膜細胞等。細胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術指導,另有細胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0907操作步驟細胞培養(yǎng)
1、冷凍管應如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細胞大都無法立即適應, 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
鈣激活中性蛋白酶6(CAPN6)ELISA試劑盒 ,英文名: CAPN6 ELISA Kit
鈣激活中性蛋白酶1(CAPN1)ELISA試劑盒 ,英文名: CAPN1 ELISA Kit
鈣蛋白酶抑制蛋白(T)ELISA試劑盒 ,英文名: T ELISA Kit
鈣蛋白酶抑素抗體(AT-DⅣ)ELISA試劑盒 ,英文名: AT-DⅣ ELISA Kit
鈣蛋白酶2(M/II)大亞基(CAPN2)(CAPN2)ELISA試劑盒 ,英文名: CAPN2 ELISA Kit
鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2(CAMK 2)ELISA試劑盒 ,英文名: CAMK 2 ELISA Kit
富組蛋白(HTN5)ELISA試劑盒 ,英文名: HTN5 ELISA Kit
富組蛋白(histatin-5)ELISA試劑盒 ,英文名: histatin-5 ELISA Kit
富組氨酸糖蛋白(HRG)ELISA試劑盒 ,英文名: HRG ELISA Kit
富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)ELISA試劑盒 ,英文名: LRG1 ELISA Kit
富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61/CCN1)ELISA試劑盒 ,英文名: Cyr61/CCN1 ELISA Kit
復制蛋白A(RPA-70)ELISA試劑盒 ,英文名: RPA-70 ELISA Kit
復合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒 ,英文名: CPSA ELISA Kit
小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)免疫試劑盒 Mouse Anti-glucoprotein 210,GP210 ELISA Kit
小鼠還原型谷胱甘肽(GSH)免疫試劑盒 Mouse reduced glutathione,GSH ELISA Kit
小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)免疫試劑盒 Mouse Caspase 3,Casp-3 ELISA Kit
小鼠胱天蛋白酶10(P-10)免疫試劑盒 Mouse Caspase-10,P10 ELISA kit
小鼠骨粘連蛋白(ON)免疫試劑盒 Mouse osteonectin,ON ELISA Kit
小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)免疫試劑盒 Mouse Bone morphogenetic protein 6,BMP-6 ELISA Kit
小鼠骨形成蛋白(BMPs)免疫試劑盒 Mouse bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA Kit
小鼠骨涎蛋白(BSP)免疫試劑盒 Mouse Bone sialoprotein,BSP ELISA kit
小鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)免疫試劑盒 Mouse Bone-specific Alkphase B,ALP-B ELISA Kit
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0907操作步驟小鼠骨特性堿性磷酸酶C端肽免疫試劑盒 Mouse C-terminal peptide of bone-specific alkaline phosphatase ELISA kit
小鼠骨特性堿性磷酸酶(BALP)免疫試劑盒 Mouse Bone-specific alkaline phosphatase,BALP ELISA kit
小鼠骨橋素(OPN)免疫試劑盒 Mouse Osteopontin,OPN ELISA Kit
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責,儀表網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務必確認供應商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。