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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光定量PCR>> 50次非洲豬瘟病毒PCR試劑盒

非洲豬瘟病毒PCR試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)50次

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-08-11 16:53:33瀏覽次數(shù):203次

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非洲豬瘟病毒PCR試劑盒運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區(qū)域操作。

產(chǎn)品特點(diǎn):

高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:非洲豬瘟病毒PCR試劑盒
產(chǎn)品分類:熒光定量PCR
貨號(hào):CP100996
產(chǎn)品規(guī)格:50
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20保存
產(chǎn)品有效期:一年儲(chǔ)存條件:
14
或-20樣品收集、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.
血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3.
細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5.
保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix 
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
 2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl      
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s →58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 保溫7min。
注意事項(xiàng):
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,32。
2.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3.
7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7.
用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8.
如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.
如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽性對(duì)照。

無毒型核酸染色劑4S Green Nucleic Acid Stain 4S Green質(zhì)量規(guī)格:BR  人硫酸角質(zhì)素(KS)ELISA檢測試劑盒Humankeratansulfate,KSELISAKit 96T/48T  Human1,5-anhydroglucitol,1,5-AGELISA試劑盒人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

5,5--1,3-環(huán)己二酮5,5-Dimethyl-1,3-cyclohexanedione質(zhì)量規(guī)格:BR  大鼠腺苷三1酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)試劑盒 Rat ATP-binding Cassette anspoer A1,ABCA1 ELISA Kit  Humanai-IVIgGaibodyELISAKit人抗IVIgG抗體ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

5-氟胞苷(>98%,BR)5-Fluorocytidine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR  英文名稱Rathemeoxygenase-2ELISAKit大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)規(guī)格:96T/48T  人白細(xì)胞分化抗原14(CDl4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4-傘形酮-β-D-木糖苷4-Methylumbelliferyl-β-D-xylopyranoside Printable Reviews質(zhì)量規(guī)格:0.99  光鏡樣品固著液(10%Formalin固著液)50毫升  兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)試劑盒 Rabbit iercellular adhesion molecule 1,ICAM-1/CD54 ELISA Kit
十烷基三氯化銨質(zhì)量規(guī)格:>99%Decyltrimethylammonium chloride  英文名稱RatEsadiol(E2)ELISAkit大鼠雌二醇(E2)ELISAKit規(guī)格:96T/48T  大鼠主要堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 ,英文名: MBP ELISA Kit

辛基三氯化銨;八烷基三氯化銨質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRTrimethyloctylammonium chloride   細(xì)胞總核蛋白萃取試劑盒20  人β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA檢測試劑盒HumanBeta-Endorphieceptor,β-EPRELISAKit 96T/48T

DMS質(zhì)量規(guī)格:BRDMS  ELISAKitBPI人殺菌性/通透性增加蛋白規(guī)格:48T/96T  大鼠雌二醇(E2)試劑盒 Rat Esadiol,E2 ELISA Kit

D-正亮氨酸(>99%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BCD-Norleucine  小鼠白介素5(IL5)ELISA試劑盒 ,英文名: IL5 ELISA Kit  CLIAKitfoPAELISAKit大鼠組織多肽抗原規(guī)格:48T/96T
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