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人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2操作步驟

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人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
細(xì)胞名稱      人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2操作步驟
形態(tài)特性       上皮細(xì)胞樣
生長特性      貼壁生長
特征特性       該細(xì)胞屬源于正常腎的近曲小管細(xì)胞,通過導(dǎo)入HPV-16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16 E6/E7基因的重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7轉(zhuǎn)染外生包裝細(xì)胞Psi-2,Psi-2細(xì)胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細(xì)胞系PA317,Z后將PA317產(chǎn)生的病毒顆粒導(dǎo)入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細(xì)胞。盡管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性,但未用G418篩選轉(zhuǎn)導(dǎo)克隆。Southern和FISH分析顯示HK-2細(xì)胞來源于單克隆。PCR檢測證實(shí)HK-2細(xì)胞基因組中含有E6/E7基因。 
培養(yǎng)條件       DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  10%FBS
傳代方法       1:4傳代;2~3天換液1次。
傳代情況      P9
凍存條件       基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測      培養(yǎng)法(-)
STR       Amelogenin:X;CSF1PO:13;D13S317:9;D16S539:11,12;D18S51:12;D19S433:15,15.2;D21S11:28,30;D2S1338:17,25;D3S1358:16,17;D5S818:12;D7S820:10,11;D8S1179:10,14;FGA:20,22;TH01:9;TPOX:8,9;vWA:17,18;
同工酶      
染色體       57~60
使用權(quán)限      A類  
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會造成細(xì)胞無法存活。
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
 大蕉Musa sapientum    Cyclomusalenone    環(huán)淡菜酮    30452-60-9    C30H48O    ≥95%
大黃梔子Gardenia sootepensis    5''-O-Syringoylkelampayoside A    3,4,5-*氧基苯基 6-O-[5-O-(4-羥基-3,5-二甲氧基苯甲?;?-D-芹糖-BETA-D-呋喃糖基]-BETA-D-葡萄糖苷    1014974-98-1    C29H38O17    ≥95%
大黃梔子Gardenia sootepensis    Secaubryenol    none    925932-08-7    C30H48O3    ≥97%
大黃梔子Gardenia sootepensis    Secaubrytriol    none    925932-10-1    C30H50O5    ≥96.5%
大黃梔子Gardenia sootepensis    5,7,3'-Trihydroxy-6,4',5'-trimethoxyflavanone    5,7,3'-三羥基-6,4',5'-*氧基黃烷酮    310888-07-4    C18H18O8    ≥98%
大黃Rheum palmatum L.    Aloe-emodin    蘆薈大黃素    481-72-1    C15H10O5    ≥98%
大黃Rheum palmatum L.    Aloe-emodin-8-O-beta- D-glucopyranoside    蘆薈大黃素-8-O-葡萄糖苷    33037-46-6    C21H20O10    ≥98%
大黃Rheum officinale Baill    Emodin    大黃素    518-82-1    C15H10O5    ≥98%
大黃Rheum officinale Baill    Emodin 1-glucoside    大黃素-1-O-葡萄糖苷    38840-23-2     C21H20O10    ≥98%
大黃Rheum officinale Baill    Emodin-8-O-β-D- glucopyranoside    大黃素-8-O-β-D- 葡萄糖苷    23313-21-5    C21H20O10    ≥98%
大黃 Rheum palmatum L.    Physcion    大黃素甲醚    521-61-9    C16H12O5    ≥98%

Phospho-Paxillin    磷酸化樁蛋白Paxillin抗體
Phospho-Paxillin    磷酸化樁蛋白Paxillin抗體
phospho-PKC beta 1/2    磷酸化蛋白激酶C β1/β2抗體
PGRMC    孕激素受體膜相關(guān)元件抗體
Phospho-p63     磷酸化P63腫瘤抑制基因抗體
PIG3    p53誘導(dǎo)蛋白3抗體
PRMT4    組蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶CARM1抗體
PPAP2C    磷酸脂磷酸水解酶2抗體
p107    視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體
phospho-P53    磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體
PIGR    多聚免疫球蛋白受體抗體
PCDHB16    原鈣粘蛋白16抗體
PRDM2    鋅指蛋白RIZ1抗體
PRMT6    組蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶6抗體
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2操作步驟PRSS8    絲氨酸蛋白酶8抗體
phospho-PAK1/2/3    磷酸化p21激活激酶1/2/3抗體
Prostaglandin dehydrogenase 1    前列腺素脫氫酶1抗體
phospho-PRKCZ    磷酸化蛋白激酶C抗體

 

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