購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細胞價格并預約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產(chǎn)品僅用于科研

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

 ENK 人腦啡肽 規(guī)格： 48T/96T

 BGP/Gehrelin 人腦腸肽 規(guī)格： 48T/96T

 visfatin 人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素 規(guī)格： 48T/96T

 vaspin 人內(nèi)臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑 規(guī)格： 48T/96T

 EL 人內(nèi)皮脂肪酶 規(guī)格： 48T/96T

 ES 人內(nèi)皮抑素 規(guī)格： 48T/96T

 eNOS-3 人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3 規(guī)格： 48T/96T

 eNOS 人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶 規(guī)格： 48T/96T

 ET-1 人內(nèi)皮素1 規(guī)格： 48T/96T

 ET-1 人內(nèi)皮素1 規(guī)格： 48T/96T

 EG-VEGF 人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子 規(guī)格： 48T/96T

XL10-Gold 電擊感受態(tài)細胞 50ul*20 ET 人內(nèi)毒素 規(guī)格： 48T/96T

 TdT 人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶 規(guī)格： 48T/96T

 TCC C5b-9 人末端補體復合物C5b-9 規(guī)格： 48T/96T

 ponticulin 人膜橋蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 ANX-Ⅴ 人膜聯(lián)蛋白Ⅴ 規(guī)格： 48T/96T

 MAC 人膜攻擊復合物 規(guī)格： 48T/96T

 MCP/CD46 人膜輔蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 MIS/AMH 人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素 規(guī)格： 48T/96T

 IAP 人免疫抑制酸性蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 IgHV *重鏈可變區(qū) 規(guī)格： 48T/96T

 IgH *重鏈 規(guī)格： 48T/96T

 ILTsR/LIR/CD85 *樣轉(zhuǎn)錄體受體 規(guī)格： 48T/96T

 λ-IgLC *輕鏈lambda 規(guī)格： 48T/96T

 κ-IgLC *輕鏈kappa抗體 規(guī)格： 48T/96T

 IgM *M 規(guī)格

5-溴-2-氟苯甲酸 146328-85-0

(S)-(-)-叔丁基亞磺酰胺 146374-27-8

2,6-二甲氧基苯甲酸 1466-76-8

2-氯腺嘌呤核苷 146-77-0

(S)-4-N-叔丁氧羰基-2-甲基甲酸 147081-29-6

(S)-1-叔丁氧羰基-3-氨基吡咯烷 147081-44-5

2-溴-5-氟* 147460-41-1

順式-1,4-二氯-2-丁烯 1476-11-5

D-酒石酸 147-71-7

(四氫-2H-吡喃-4-基)甲醇 14774-37-9

4-氟-2-甲基苯腈 147754-12-9

1,3-苯二甲 1477-55-0

L-* 147-85-3

硫代水楊酸 147-93-3

5-氯-2-氟吡啶 1480-65-5

8-羥基喹啉 148-24-3

2-溴-5-三氟甲基苯腈 1483-55-2

3-芐氧基苯胺 1484-26-0

2-哌啶乙醇 1484-84-0

鄰* 148-53-8

4-溴-3-甲基苯甲酸甲酯 148547-19-7

1,3-二溴-5-氯苯 14862-52-3

HATU2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 148893-10-1

三氯化釕 14898-67-0

L-2-氨基丁酸 1492-24-6

三氟甲磺酸 1493-13-6

1-氟-2-硝基苯 1493-27-2

吊白塊 次硫酸氫鈉甲醛 149-44-0

： 48T/96T

 Ig-j *j鏈 規(guī)格： 48T/96T

注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。