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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

4-氯吡啶 N-氧化物 1121-76-2

3-羥基-6-甲基吡啶 1121-78-4

3-氯-6-甲基噠嗪 1121-79-5

間氟碘苯 1121-86-4

4-乙酰吡啶 1122-54-9

4-二甲氨基吡啶 1122-58-3

2-乙?；拎?1122-62-9

6-甲基-2-吡啶甲醛 1122-72-1

4-溴環(huán)己醇 1122-91-4

棕櫚酸甲酯 112-39-0

4-硝基吡啶-N-氧化物 1124-33-0

三甘醇二甲醚 112-49-2

十二硫醇 112-55-0

5-氨基異喹啉 1125-60-6

XL1-Blue MRF`Kan 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50硬酯酸甲酯C18 112-61-8

3-氮雜雙環(huán)[3.3.0]辛烷鹽酸鹽 112626-50-3

4-溴-2-氟苯甲酸 112704-79-7

D-叔*鹽酸鹽 112720-39-5

十八烷酰氯 112-76-5

順式十八碳-9-烯酸 112-80-1

Fmoc-3-(2-萘基)-L-* 112883-43-9

5-溴-3-吡啶甲醛 113118-31-3

4-環(huán)己基* 1131

Pro-ANP 大鼠前心鈉肽 規(guī)格： 48T/96T

 PSA 大鼠前列腺特異性抗原 規(guī)格： 48T/96T

 PAP 大鼠前列腺酸性磷酸酶 規(guī)格： 48T/96T

 PGF 大鼠前列腺素F 規(guī)格： 48T/96T

 PGE2 大鼠前列腺素E2 規(guī)格： 48T/96T

 PGE1 大鼠前列腺素E1 規(guī)格： 48T/96T

 GIP 大鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽 規(guī)格： 48T/96T

 ODF 大鼠破骨細(xì)胞分化因子 規(guī)格： 48T/96T

 CORT 大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮 規(guī)格： 48T/96T

 Cortisol 大鼠* 規(guī)格： 48T/96T

 CIAP 大鼠牛小腸堿性磷酸酶 規(guī)格： 48T/96T

 FIX 大鼠*IX 規(guī)格： 48T/96T

 FⅫ 大鼠*Ⅻ 規(guī)格： 48T/96T

 FⅩⅢ 大鼠*ⅩⅢ 規(guī)格： 48T/96T

 FⅩ 大鼠*Ⅹ 規(guī)格： 48T/96T

 FⅧ-Ag 大鼠*Ⅷ相關(guān)抗原 規(guī)格： 48T/96T

 FⅢ 大鼠*Ⅲ 規(guī)格： 48T/96T

 FⅡ 大鼠*Ⅱ 規(guī)格： 48T/96T

 TR 大鼠*受體 規(guī)格： 48T/96T

 TAT 大鼠*抗*復(fù)合物 規(guī)格： 48T/96T

 Gelsolin 大鼠凝溶膠蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 CS 大鼠檸檬酸合酶 規(guī)格： 48T/96T

 PLAUR/uPAR 大鼠*型纖溶酶原激活物受體 規(guī)格： 48T/96T

 uPA 大鼠*型纖溶酶原激活物 規(guī)格： 48T/96T

 UK 大鼠* 規(guī)格： 48T/96T

 BDNF 大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子 規(guī)格： 48T/96T

 BNP 大鼠腦鈉素/腦鈉尿肽 規(guī)格： 48T/96T

-60-8

3,4-二甲氧基苯乙酮 1131-62-0

注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。