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DH5α 感受態(tài)細胞100ul*100-生命科學儀器
DH5α 感受態(tài)細胞100ul*20-生命科學儀器
JM109 感受態(tài)細胞 100ul*20-生命科學儀器
Mach1-T1 感受態(tài)細胞 100ul*100-生命科學儀器
Mach1-T1 感受態(tài)細胞 100ul*20-生命科學儀器
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產品名稱 | TG1 電擊感受態(tài)細胞 50ul*5 |
包裝 | 50ul*5 |
分類 | 克隆感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質粒或連接產物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
人抗IVIgG抗體ELISA Kit,48T/96T 人抗IVIgG抗體ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
人抗IgE受體抗體ELISA Kit,48T/96T 人抗IgE受體抗體ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
anti-IgA-Ab 人抗IgA抗體 規(guī)格: 48T/96T
EBV 人抗EB病毒抗體 規(guī)格: 48T/96T
anti-DNase B 人抗DNA酶B抗體 規(guī)格: 48T/96T
BP180-Ab 人抗BP180抗體 規(guī)格: 48T/96T
BB-Ab 人抗BB抗體 規(guī)格: 48T/96T
LP Ag 人軍團菌抗原 規(guī)格: 48T/96T
Agrin 人聚集蛋白 規(guī)格: 48T/96T
Agrin 人聚集蛋白 規(guī)格: 48T/96T
MIF 人巨噬細胞移動抑制因子 規(guī)格: 48T/96T
MIP-5 人巨噬細胞炎性蛋白5 規(guī)格: 48T/96T
MIP-3β/ELC 人巨噬細胞炎性蛋白3β 規(guī)格: 48T/96T
MIP-3α/CCL20 人巨噬細胞炎性蛋白3α 規(guī)格: 48T/96T
MIP-2 人巨噬細胞炎性蛋白2 規(guī)格: 48T/96T
MIP-1β/CCL4 人巨噬細胞炎性蛋白1β 規(guī)格: 48T/96T
MIP-1α/CCL3 人巨噬細胞炎性蛋白1α 規(guī)格: 48T/96T
AmAC-1 人巨噬細胞替代激活相關化學因子1 規(guī)格: 48T/96T
MCF 人巨噬細胞趨化因子 規(guī)格: 48T/96T
MDC/CCL22 人巨噬細胞來
間苯二甲酸單甲酯 1877-71-0
3-氰基苯甲酸 1877-72-1
3-氯并咪唑 1878-65-5
3-溴并咪唑 1878-67-7
TG1 電擊感受態(tài)細胞 50ul*56-氮* 18802-37-4
(R)-1-叔丁氧羰基-3-氨基哌啶 188111-79-7
O-叔丁基-L-* 18822-59-8
5-甲氧基-2-硝基苯甲酸 1882-69-5
氯甲酸苯酯 1885-14-9
2-氨基苯甲腈 1885-29-6
肉桂腈 1885-38-7
L-*甲酯 18869-47-1
4-叔丁基芐溴 18880-00-7
4-氧代氮雜環(huán)庚烷-1-羧酸叔丁酯 188975-88-4
二氟氯鈉 1895-39-2
4,5-二氟鄰苯二甲酸 18959-31-4
2,6-二氟苯腈 1897-52-5
5-溴-2-呋喃甲醛 1899-24-7
源的趨化因子 規(guī)格: 48T/96T
M-CSFR 人巨噬細胞集落刺激因子受體 規(guī)格: 48T/96T
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?;蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?;蚋咝实倪B接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2.待感受態(tài)細胞融化后,向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
5.根據實驗需求,取適量已轉化的感受態(tài)細胞,加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時。
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