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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

 anti-HAV 人抗甲型肝炎病毒IgG抗體 規(guī)格： 48T/96T

 EMA IgA 人抗肌內(nèi)膜抗體IgA 規(guī)格： 48T/96T

 TTN 人抗肌聯(lián)蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T

 AAA 人抗肌動(dòng)蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T

 CCP 人抗環(huán)胍氨酸肽抗體 規(guī)格： 48T/96T

 RSV 人抗呼吸道合胞病毒抗體 規(guī)格： 48T/96T

 RBC 人抗紅細(xì)胞抗體 規(guī)格： 48T/96T

 APF 人抗核周因子抗體 規(guī)格： 48T/96T

 ANF 人抗核因子抗體 規(guī)格： 48T/96T

 AnuA-IgG 人抗核小體抗體IgG 規(guī)格： 48T/96T

 ARPA/Rib-P 人抗核糖體P蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T

 TG1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10RNP-Ab 人抗核糖核蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T

 AFA/snoRNP/U3RNP 人抗核仁纖維蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T

 ANA 人抗核仁抗體 規(guī)格： 48T/96T

 gp210 人抗核膜糖蛋白210抗體 規(guī)格： 48T/96T

 ANA 人抗核抗體 規(guī)格： 48T/96T

 ASA 人抗骨骼肌抗體 規(guī)格： 48T/96T

 anti-tox IgM 人抗弓形體IgM抗體 規(guī)格： 48T/96T

 anti-tox IgG 人抗弓形體IgG抗體 規(guī)格： 48T/96T

 AGAA 人抗高爾基體抗體 規(guī)格： 48T/96T

 LMA 人抗肝細(xì)胞膜抗體 規(guī)格： 48T/96T

 LC1 人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體 規(guī)格： 48T/96T

 LSP 人抗肝特異性脂蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T

 LSP 人抗肝特異性脂蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T

 LKM 人抗肝腎微粒體抗體 規(guī)格

*化亞砜 1774-47-6

正丙基硼酸 17745-45-8

4-甲基-3-噻吩硼酸 177735-11-4

四甲基氟化銨 17787-40-5

1-Boc-2-氨甲基吡咯烷 177911-87-4

甲基三苯基溴化 1779-49-3

4,6-二氯-2-甲基嘧啶 1780-26-3

2,4,6-三氯-5-甲基嘧啶 1780-36-5

2-氟-6-硝基苯胺 17809-36-8

3-氨基茴香硫醚 1783-81-9

D-天* 1783-96-6

對(duì)肼基苯磺酰胺鹽酸鹽 17852-52-7

4-(甲基磺?；?苯肼鹽酸鹽 17852-67-4

鉻黑 T 1787-61-7

2,6-二氯-3-氟苯甲酸 178813-78-0

4-N-Boc-氨基環(huán)己酮 179321-49-4

異氰酸異丙酯 1795-48-8

2-氟-5-溴苯腈 179897-89-3

3-溴-5-氟苯腈 179898-34-1

4-羧基苯硼酸頻那醇酯 180516-87-4

叔丁基二甲基氯硅烷 18162-48-6

3-氨基吡唑 1820-80-0

2-氨基6-甲基吡啶 1824-81-3

乙烯基溴化鎂 1826-67-1

： 48T/96T

注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開(kāi)，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。