購買客戶請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。產(chǎn)品僅用于科研

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

BOC-D-* 16937-99-8

硼氫 16940-66-2

六氟磷酸 16940-81-1

六氟磷酸銨 16941-11-0

N-叔丁氧羰基-L-* 15761-38-3

2-(羥甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯 157634-00-9

對(duì)甲苯磺酰肼 1576-35-8

1-叔丁氧羰基-4-哌啶乙酸 157688-46-5

1-甲基-4-溴吡唑 15803-02-8

6-氰基吲哚 15861-36-6

(S)-甲酸-2-羧酸二鹽158663-69-5

鹽酸利莫那班 158681-13-1

3-甲氧基-1-丙醇 1589-49-7

二聚醋酸銠 15956-28-2

N-Boc-4-亞甲基哌啶 159635-49-1

2-氨基-6-氟吡啶 1597-32-6

4-(氨甲基)苯腈鹽酸鹽 15996-76-6

汞 1600-27-7

碘代*硅烷 16029-98-4

2-氨基-5-甲基吡啶 1603-41-4

S-環(huán)氧丙烷 16088-62-3

叔丁基異氰酸酯 1609-86-5

2,5-二氯吡啶 16110-09-1

3,5-二溴甲苯 16

  PIPLC 人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C 規(guī)格： 48T/96T

 PLCγ1 人磷酯酶Cγ鏈 規(guī)格： 48T/96T

 PLC 人磷酯酶C 規(guī)格： 48T/96T

 PI Ab-IgG/IgM 人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 規(guī)格： 48T/96T

 DB3.1 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*5GPC-3 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 規(guī)格： 48T/96T

 PL-A2 人磷脂酶A2 規(guī)格： 48T/96T

 PCK 人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 規(guī)格： 48T/96T

 PGM 人磷酸葡萄糖變位酶 規(guī)格： 48T/96T

 PI3K 人磷酸肌醇3激酶 規(guī)格： 48T/96T

 PaCoA 人磷酸化乙酰* 規(guī)格： 48T/96T

 pERK 人磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶 規(guī)格： 48T/96T

 P-PKC 人磷酸化蛋白激酶C 規(guī)格： 48T/96T

 PGAM2 人磷酸甘油酸變位酶2 規(guī)格： 48T/96T

人淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit，48T/96T 人淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

 Lptn/LTN/XCL1 人淋巴細(xì)胞趨化因子 規(guī)格： 48T/96T

 LFA-3/CD58 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3 規(guī)格： 48T/96T

 LFA-2/CD2 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2 規(guī)格

11-92-3

注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過長，長時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。