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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2019-09-20 14:50:21瀏覽次數(shù):141次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)DH5α 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100-生命科學(xué)儀器
DH5α 感受態(tài)細(xì)胞100ul*20-生命科學(xué)儀器
JM109 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*20-生命科學(xué)儀器
Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100-生命科學(xué)儀器
Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*20-生命科學(xué)儀器
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產(chǎn)品名稱 | DB3.1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 |
包裝 | 100ul*10 |
分類 | 克隆感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
IgG *G 規(guī)格: 48T/96T
Fcγ *G Fc片段 規(guī)格: 48T/96T
FcγRⅢ/CD16 *G Fc段受體Ⅲ 規(guī)格: 48T/96T
FcγRⅡ/CD32 *G Fc段受體Ⅱ 規(guī)格: 48T/96T
FcγRⅠ/CD64 *G Fc段受體Ⅰ 規(guī)格: 48T/96T
IgE *E 規(guī)格: 48T/96T
FcεRⅡ/CD23 *E Fc段受體Ⅱ 規(guī)格: 48T/96T
FcεRⅠ *E Fc段受體Ⅰ 規(guī)格: 48T/96T
IgA *A 規(guī)格: 48T/96T
FcαRⅠ/CD89 *A Fc段受體Ⅰ 規(guī)格: 48T/96T
Irna 人免疫核糖核酸 規(guī)格: 48T/96T
DB3.1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 irGH 人免疫反應(yīng)性生長(zhǎng)激素 規(guī)格: 48T/96T
PWM 人美洲商陸素 規(guī)格: 48T/96T
CED-3 人美麗線蟲(chóng)凋亡基因 規(guī)格: 48T/96T
ankyrin 人錨蛋白 規(guī)格: 48T/96T
ATM 人毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因 規(guī)格: 48T/96T
Gliadin-IgA 人麥角蛋白IgA 規(guī)格: 48T/96T
MV IgM 人麻疹病毒IgM 規(guī)格: 48T/96T
MV IgG 人麻疹病毒IgG 規(guī)格: 48T/96T
MV 人麻疹病毒 規(guī)格: 48T/96T
PF 人落葉型天皰瘡抗體 規(guī)格: 48T/96T
Helical Peptide 人螺旋肽 規(guī)格: 48T/96T
RV Ag 人輪狀病毒抗原 規(guī)格
原甲酸*酯 149-73-5
DL-焦* 149-87-1
二苯基次膦酰氯 1499-21-4
氯化銥 14996-61-3
4-氯甲?;∷峒柞?1501-26-4
對(duì)氨基苯甲酸 150-13-0
3-甲氧基* 150-19-6
DL-苯* 150-30-1
二芐基二硫 150-60-7
4-甲氧基* 150-76-5
對(duì)苯二甲醚 150-78-7
莫西沙星 151096-09-2
1,3-二甲氧基苯 151-10-0
4-溴-1-茚酮 15115-60-3
十二烷基硫酸鈉 151-21-3
3-羥基-2-硝基吡啶 15128-82-2
2,6-二氟吡啶 1513-65-1
: 48T/96T
注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個(gè)離心管中加入450μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開(kāi),將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。
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