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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

2-甲基氮雜環(huán)丁烷 19812-49-8

2,3-二氯茴香醚 1984-59-4

2-(三氟甲氧基)芐基溴 198649-68-2

(R)-(-)-2- 苯基*甲酯 19883-41-1

(R)-3-羥基哌啶鹽酸鹽 198976-43-1

FMOC-L-4-甲* 199006-54-7

3-甲基-4吡啶 1990-90-5

BOC-N-甲基-D-* 19914-38-6

(R)-1-Boc-3-氨甲基吡咯烷 199174-29-3

4-基-L-苯* 1991-87-3

3-甲氧基酸甲酯 19924-43-7

HB101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50分子篩,4A型,粉末< 50 微米 20027-76-1

6-氯嘌呤核苷 2004-06-0

N-甲基-N-(3-甲基吡啶)胺 20173-04-0

聯(lián)硼酸新戊二醇酯 201733-56-4

N-BOC-2-甲氨基乙胺鹽酸鹽 202207-79-2

L-纈氨醇 2026-48-4

 Des 6T

 CGRP 人降鈣素基因相關(guān)肽 規(guī)格： 48T/96T

 CT 人降鈣素 規(guī)格： 48T/96T

 BFP 人堿性胎兒蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 ALP 人堿性磷酸酶 規(guī)格： 48T/96T

 bFGF-9 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子9 規(guī)格： 48T/96T

 bFGF-6 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子6 規(guī)格： 48T/96T

 bFGF-4 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子4 規(guī)格： 48T/96T

 bFGF 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子 規(guī)格： 48T/96T

 Cx 人間隙連接蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 ALK 人間變性淋巴瘤激酶 規(guī)格： 48T/96T

 TAb 人甲狀腺素抗體 規(guī)格： 48T/96T

 T4 人甲狀腺素 規(guī)格： 48T/96T

 TG 人甲狀腺球蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 TAb 人甲狀腺抗體 規(guī)格： 48T/96T

 TBG 人甲狀腺結(jié)合球蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 TPO 人甲狀腺過氧化物酶 規(guī)格： 48T/96T

 THAA 人甲狀腺非肽激素抗體 規(guī)格： 48T/96T

注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。