購買客戶請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。產(chǎn)品僅用于科研

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

shēng huà shì jì 3-碘苯甲酸 容量： 2～8℃，避光 25克

shēng huà shì jì 3-苯丙酸 容量： 100克

shēng huà shì jì 3-* 容量： 保存：-20℃ 1克

shēng huà shì jì 3-氨基異丁酸 容量： RT 5克

shēng huà shì jì 3-氨基酚 容量： 保存：-20℃ 100毫克

shēng huà shì jì 3-氨基丁酸 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 3-氨基吡啶 容量： 1克

BJ5183-AD-1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10shēng huà shì jì 3-氨基苯乙酮 容量： 保存：-20℃ 500ul

shēng huà shì jì 3-氨基苯二甲酰肼 容量： 10克

shēng huà shì jì 3-氨基-9-乙基咔唑 容量： 10克

shēng huà shì jì 3α羥基類固醇脫氫酶 容量： 保存：-20℃，避光 1毫克

shēng huà shì jì 3MM色譜層析濾紙 容量： 5克

shēng huà shì jì 3C蛋白酶 容量： 25克

shēng huà shì jì 35mm玻底培養(yǎng)皿 容量： 保存：-20℃ 1KU

shēng huà shì jì 300ul吸頭 容量： 250毫克

shēng huà shì jì 30%純度卵黃鹽水 容量： 1米

shēng huà shì jì 3-[(3-*氨丙基)二甲基氨基]-2-羥基-1-丙磺酸 容量： 保存：-20℃ 2×0.25毫升

shēng huà shì jì 3-[(3-*氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸 容量： 保存：-20℃ 2×1毫升

shēng huà shì jì 3.5%純度氯化三糖鐵瓊脂 容量： 2～8℃ 100毫升

shēng huà shì jì 3.0ml凍存管 容量： 2～8℃ 1克

abl ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

 Orexin A 人阿立新A 規(guī)格： 48T/96T

 AGPs 人阿拉伯半乳糖蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 POMC 人阿黑皮素原 規(guī)格： 48T/96T

 POMC 人阿黑皮素原 規(guī)格： 48T/96T

 AO 人吖啶橙 規(guī)格： 48T/96T

 IFN-ω 人ω干擾素 規(guī)格： 48T/96T

 Pγ 人γ肽 規(guī)格： 48T/96T

 GGT 人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶 規(guī)格： 48T/96T

 γ-ECS 人γ谷氨酰半*合成酶 規(guī)格： 48T/96T

 IFI16/p16 人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16 規(guī)格： 48T/96T

 GABA 人γ氨基丁酸 規(guī)格： 48T/96T

 IFN-γ 人γ 干擾素 規(guī)格： 48T/96T

 β-TG 人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 BTC 人β細(xì)胞素 規(guī)格： 48T/96T

人β乳糖蛋白抗體IgG ELISA Kit，48T/96T 人β乳糖蛋白抗體IgG ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

 β-Lg 人β乳球蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 β-OHB 人β羥丁酸 規(guī)格： 48T/96T

 βGD 人β葡萄糖醛酸苷酶 規(guī)格： 48T/96T

 β-glucosidase 人β葡糖苷酶 規(guī)格： 48T/96T

 β-naphthol 人β萘酚 規(guī)格： 48T/96T

 BLI 人β內(nèi)酰胺酶抑制劑 規(guī)格： 48T/96T

 β-lactamase 人β內(nèi)酰胺酶 規(guī)格： 48T/96T

 β-EPR 人β內(nèi)啡肽受體 規(guī)格： 48T/96T

 β-EP 人β內(nèi)啡肽 規(guī)格： 48T/96T

 β-Cat 人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白 規(guī)格： 48T/96T

注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過長，長時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。