嘔吐毒素免疫親和柱 貨號：FD-C31

　　簡介

　　嘔吐毒素免疫親和柱適合于和HPLC、LC-MS及DON酶免分析試劑盒結(jié)合使用，定量檢測DON。適用于谷物、飼料等樣本中的DON凈化處理，提高了樣品的純度，純化后的提取液可用不同的分析方法測定。儲存條件 2-8℃冷藏保存，不可冷凍。

　　1 嘔吐毒素免疫親和柱用途

　　適用于谷物、飼料等樣本中的DON凈化處理，提高了樣品的純度，純化后的提取液可用不同的分析方法測定。

　　2 嘔吐毒素免疫親和柱概要

　　嘔吐毒素主體成分為DON(脫氧雪腐鐮刀菌烯醇)，屬于單端孢霉烯族化合物，嘔吐毒素是食品中常見的真菌毒素，在自然界中廣泛存在，由于它們具有很高的細(xì)胞毒素及免疫抑制性質(zhì)，因此，對人類及動物的健康構(gòu)成了威脅，特別是對免疫功能具有明顯的影響對人類的健康構(gòu)也造成很大威脅，嘔吐毒素被列為3類致癌物，世界各國對食品，飼料中的嘔吐毒素都有嚴(yán)格的*。

　　3 嘔吐毒素免疫親和柱原理

　　測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)，抗嘔吐毒素(DON)的單克隆抗體連接在柱內(nèi)凝膠介質(zhì)上，樣品中的DON經(jīng)過提取、過濾、稀釋，然后將樣品提取液緩慢通過DON免疫親和柱，在免疫親和柱內(nèi)，DON與抗體結(jié)合，洗滌液通過免疫親和柱除去未被結(jié)合的雜質(zhì)。后采用甲醇洗脫DON，然后進(jìn)行相關(guān)分析。

　　4 嘔吐毒素免疫親和柱試劑配制

　　0.1%吐溫20-PBS溶液：將0.1%吐溫20-PBS粉末(廠家提供)直接用900mL水全部溶解后，用HCl或NaOH調(diào)pH至7.4，后用水定容至1L。

　　5M NaOH溶液：稱取20g NaOH，溶于100mL水中。

　　5 嘔吐毒素免疫親和柱樣品制備

　　----準(zhǔn)確稱取25g(精確至0.01g)粉碎的樣品，加入5g聚乙二醇8000，并與125mL水混合，搖床振蕩提取15min;

　　----用快速定性濾紙過濾或4000r/min，離心5min;對于pH低于6.0的玉米加工副產(chǎn)物及飼料等的濾液或上清液，需要用5M NaOH調(diào)pH至7.0左右，并用玻璃微纖維濾紙過濾，至濾液澄清，備用;

　　----準(zhǔn)確移取2.5mL混勻濾液(相當(dāng)于0.5g樣品)過親和柱。

　　6 嘔吐毒素免疫親和柱凈化

　　注意：整個純化過程盡量不要讓柱子干燥!

　　----3mL柱管取出上方堵頭，減去上堵頭螺紋下突出部分，插回柱子上，另一端與20mL針筒固定后使用;將1mL柱管上方堵頭取出后斜剪斷，然后再插回柱子上(柱管內(nèi)偶見有小氣泡屬正?，F(xiàn)象，不影響親和柱的使用);

　　----準(zhǔn)確移取上述混勻濾液，注入針筒中，調(diào)節(jié)針筒壓力使其以2秒/滴的速度緩慢通過免疫親和柱;

　　----用20mL 水沖洗柱子(對于飼料及玉米加工副產(chǎn)品等顏色較深的樣液，先用10mL 0.1%吐溫20-PBS清洗，再用10 mL 10%甲醇-水沖洗柱子，后用10mL水沖洗柱子。)，流速1秒/滴，棄去流出液，直至2~3mL空氣通過柱體，保證柱子內(nèi)沒有殘余液體;

　　----準(zhǔn)確加入1.5mL甲醇(色譜級)洗脫，流速自然重力，直至2~3mL空氣通過柱體，保證柱子內(nèi)沒有殘余液體。收集全部洗脫液，進(jìn)行相關(guān)測定。

　　7 嘔吐毒素免疫親和柱保質(zhì)期

　　有效期為12個月。

　　生產(chǎn)日期見包裝盒。