當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>光合作用系列>> 共價結合型果膠(CSP)含量微量法
貨號 | GOY-01S7005 |
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測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S7005 |
商品介紹
測定意義 果膠是構成細胞初生壁和中膠層的主要成分,主要由原果膠、果膠酸甲酯和果膠酸組成。果膠中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等,是許多高等植物細胞壁中含量的多糖成分,其*的物理、化學性質影響著植物源食品的口感和品質。果膠間以Ca2+橋及其他離子鍵、氫鍵、糖苷鍵、酯鍵和苯環(huán)偶聯的方式交聯,通過不同的抽提方法可以提取各種形式的果膠,如水溶性果膠(WSP)、離子結合型果膠(ISP)和共價結合果膠(CSP)。 測定原理: 利用帶有螯合劑的堿溶液提取共價結合型果膠(CSP),采用咔唑比色法測定果膠含量。果膠水解成半乳糖醛酸,在硫酸溶液中與咔唑試劑進行縮合反應,生成物質在530 nm處有最大吸收峰。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、80%乙醇、丙酮、濃硫酸(不允許快遞)、研缽和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。
若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通常可以使測定正常。
纖β鏈抗體Human HTR2A (5-hydroxytryptamine receptor 2A) ELISA KITD-半乳糖醛酸
構成激活過氧化活化增生受體γ樣蛋白2抗體Human MTRR (Methionine synthase reductase) ELISA KIT異丙基-β-D-硫代半乳糖苷
成蛋白相關蛋白1抗體Human PFKFB1 (6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase 1) ELISA KIT寶石紅蛋白染色試劑
腫瘤病受體同源蛋白抗體Human PGLS (6-phosphogluconolactonase) ELISA KIT葡聚糖凝膠G-150
成纖維生長因子11抗體Human ZNHIT2 ELISA Kit異丙醇
HSD13蛋白抗體Human DHCR7 (7-dehydrocholesterol reductase) ELISA KIT順二酸二甲酯
Wnt信號受體FZD2蛋白抗體Human ZNHIT1 ELISA Kit咪唑
口蹄疫病Human ZNRF2(Zinc and ring finger 2) ELISA Kit四乙酸鉛
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