您好, 歡迎來(lái)到儀表網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>感覺(jué)態(tài)細(xì)胞>>表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞>> BL21 Star(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10規(guī)格
F-BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說(shuō)明書(shū)
F-BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50品牌
JM109(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說(shuō)明書(shū)
HT115(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10規(guī)格
HT115(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50圖片
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 否 |
---|---|---|---|
適用領(lǐng)域 | 其他 |
操作方法:
一 、BL21 Star(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10規(guī)格熱激轉(zhuǎn)化法
1. 從-80℃冰箱取出感受態(tài)細(xì)胞冰浴融化后,吸取100μl感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)移到-20℃過(guò)夜預(yù)冷的搖菌管中,加入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物,輕輕混勻,冰浴30分鐘。
2. 42℃水浴熱激60秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,該過(guò)程不要搖動(dòng)搖菌管。
3. 向搖菌管中加入900μl 37℃溫浴的SOC或LB(SOC培養(yǎng)基可提高2-3倍轉(zhuǎn)化效率),37℃、180rpm、45分鐘復(fù)蘇菌種。
4. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求(質(zhì)粒,重組連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化),吸取不同體積已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞加到含相應(yīng)抗生素的LB瓊脂培養(yǎng)基上,將細(xì)胞均勻涂開(kāi)。將平板置于37℃至液體被吸收,倒置平 板,37℃過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
二、10分鐘快速轉(zhuǎn)化法
注:在使用卡那霉素,四環(huán)素等作為篩選抗性時(shí),需要在SOC培養(yǎng)基中復(fù)蘇以提高轉(zhuǎn)化效率,當(dāng)使用氨芐青霉素作為篩選抗性時(shí),該步驟可以省略。感受態(tài)細(xì)胞-DNA混合物在冰上孵育5-10分鐘后加入4倍體積的37℃溫浴的SOC培養(yǎng)基,在37℃ 180rpm孵育1小時(shí),然后轉(zhuǎn)移到37℃預(yù)熱的LB培養(yǎng)基上。
1. 提前15分鐘將用到的篩選培養(yǎng)基平板拿到37℃預(yù)熱。
2. DH 5α感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA并用手EP管底輕輕混勻,冰中靜置5分鐘。
3. 用200μl槍將感受態(tài)細(xì)胞-DNA混合物轉(zhuǎn)移到已經(jīng)37℃預(yù)熱的LB培養(yǎng)基上,涂均勻,表面無(wú)水漬。
4. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
使用說(shuō)明:
1. BL21 Star(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10規(guī)格取100 μl感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中融化。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30min。
3. 42℃熱擊45sec,然后快速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3min,該過(guò)程不要搖動(dòng)離心管。
4.每個(gè)離心管中加入450 μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床, 150 rpm振蕩培養(yǎng)45~60min使菌體復(fù)蘇。
5. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開(kāi),將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12~16h。
培養(yǎng)方法:
BL21 Star(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10規(guī)格收到細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況,如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)又要開(kāi)始了,科研工作者又該忙碌了,大家可能都在尋找適合自己的細(xì)胞,不用急,我們幫您掌舵,讓您滿意!
傳代方法:細(xì)胞*匯合時(shí),倒掉舊液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)細(xì)胞后棄掉胰酶,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
中文名稱:BL21 Star(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10規(guī)格
規(guī)格:100ul*10
用途:生化試劑。(用于科研試驗(yàn)研究)
儲(chǔ)存條件: -70℃保存,必須加干冰運(yùn)輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個(gè)月。
外觀:(性狀) 干冰運(yùn)輸,單加10kg干冰費(fèi)
單位: 袋
ELISA Kit for Human Glycogen synthase kinase-3 beta
96T0.625-40 ng/mL人糖蛋白Ⅴ(GPV)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Platelet glycoprotein V
96T0.312-20 ng/mL人間隙連接α-1蛋白(GJA1)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Gap junction alpha-1 protein
96T0.312-20ng/mL人生長(zhǎng)抑制特異性蛋白1(GAS1)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Growth arrest-specific protein 1
96T1.56-100 ng/mL人血小板膜糖蛋白VI(GP6)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Platelet glycoprotein VI
96T78-5000 pg/mL人顆粒酶M(Granzyme M)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Granzyme M
96T0.156-10 ng/mL人生長(zhǎng)激素釋放肽(GHRP)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Appetite-regulating hormone
96T0.125-8 ng/mL人Gremlin 1(GREM1)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Gremlin-1
BL21 Star(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10規(guī)格 2310 人成纖維母細(xì)胞-新生兒(HDF-n)( 5×105 )
2320 人成纖維母細(xì)胞-成人(HDF-a)( 5×105 )
3. 毛發(fā)細(xì)胞系統(tǒng)
2400 人毛發(fā)干細(xì)胞(HHDPC)( 5×105 )
2410 人毛發(fā)基質(zhì)細(xì)胞(HHZMC)( 5×105 )
2420 人外殼細(xì)胞(HHorSC)( 5×105 )
2430 人內(nèi)殼細(xì)胞(HHirSC)( 5×105 )
4. 淋巴細(xì)胞系統(tǒng)
2500 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞 (HLEC)( 5×105 )
2530 人淋巴成纖維細(xì)胞 (HLF)( 5×105 )
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。