當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>蛋白含量測定系列>> 酸性蛋白酶可見分光光度法檢測試劑盒
貨號 | GOY-01S6624 |
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操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/24樣 |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
貨號 | GOY-01S6624 |
商品介紹:
測定意義
ACP是一種在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解的酶。該酶主要用于酒精發(fā)酵、啤酒釀造、毛皮軟化、果酒澄清、醬油釀造、飼料等。
測定原理:
酸性條件下,ACP催化酪蛋白水解產(chǎn)生;在堿性條件下,還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán);鎢藍(lán)在680nm有特征吸收峰,通過測定其吸光度增加,來計(jì)算ACP活性。
自備儀器和樣品:
水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、0.5 mL EP管和蒸餾水。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
Pseudomonas fluorescensθ-防御素檢測試劑盒
Pseudomonas marginalis聚乙二主鏈的IgG抗體檢測試劑盒
Pseudomonas agarici單腺苷激活蛋白檢測試劑盒
Pseudomonas synxantha還原黃素腺嘌呤二核苷酸檢測試劑盒
Pseudomonas marginalis基質(zhì)金屬蛋白19檢測試劑盒
Xanthobacter flavus基質(zhì)金屬蛋白20檢測試劑盒
Gluconobacter sp.基質(zhì)金屬蛋白19檢測試劑盒
Pseudonocardia kongjuensis基質(zhì)金屬蛋白20檢測試劑盒
酸性蛋白酶可見分光光度法檢測試劑盒LQ-690K的色帶芯Anti-DRD5 receptor/FITC 熒光素標(biāo)記抗多巴受體-D5抗體IgG雞協(xié)同激分子受體(CMR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
氨環(huán) 98%Anti-Phospho-Dab1 (Tyr220) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化Disabled 1抗體IgG雞環(huán)腺苷二核糖水解(cADPRH/CD38)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
4-(氨) 97%Anti-Phospho-Dab1 (Tyr232) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化Disabled 1抗體IgG雞鈣聯(lián)蛋白(CNX)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
周效磺 96%Anti-Phospho-Dab1 (Ser491) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化Disabled 1抗體IgG雞堿性唾液脯氨豐富蛋白2(PRB2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
周效磺 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-Phospho-DBC1 (Thr454) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化膀胱癌缺失因1IgG雞周期素B(CCNB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
1,2-環(huán)己二 99%Anti-DAP-5/p97 /FITC 熒光素標(biāo)記死亡相關(guān)蛋白5抗體IgG雞原纖維蛋白1(FBN1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
natural, ≥98%, FCCAnti-DBC1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠膀胱癌缺失因1抗體IgG雞激肽釋放6(KLK6)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
偏鈣 39-44% B2O3 basis, 31-37% CaO basis, powderAnti-DAPK1/FITC 熒光素標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白激1抗體IgG雞凋亡蛋白激活因子1(APAF-1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
八-O-乙酰-D-(+)-蔗糖 98%Anti-DAPK2/FITC 熒光素標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白激2抗體IgG雞視網(wǎng)膜母瘤蛋白1(RB1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
β-D-葡萄糖五乙酯 98%Anti-DAPK3/FITC 熒光素標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白激3抗體IgG雞心肌鈣黏蛋白(H-Cadherin)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
曲 99%Anti-DARPP32/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠多巴、cAMP調(diào)節(jié)蛋白抗體IgG雞色素P450家族成員26A1(CYP26A1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
α-D(+)-五乙酰葡萄糖 98%Anti-Phospho-DARPP32 (Thr34) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化多巴、cAMP調(diào)節(jié)蛋白抗體IgG雞脂筏特征蛋白2(FLOT2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
乙酰溴-α-D-葡萄糖 包含 1% CaCO3 穩(wěn)定劑, 98%Anti-Phospho-DARPP32 (Thr75) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化多巴、cAMP調(diào)節(jié)蛋白抗體IgG雞抗心脂抗體IgG(ACA-IgG)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
4,4'-四二氨二 98%Anti-phospho-Cyclin E(Thr395) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化周期素E抗體IgG雞色素P450家族成員24A1(CYP24A1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
蒿本內(nèi)酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥90%Anti-Crk p38 (phospho Y221) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化Crk p38抗體IgG雞狀腺素抗體(TAb)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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