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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氨基酸代謝系列>> 氨基酸(AA)含量微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6530 |
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操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 100管/96樣 |
檢測(cè)方法 | 微量法 |
貨號(hào) | GOY-01S6530 |
商品介紹:
測(cè)定意義
動(dòng)物肝臟、腎臟是氨基酸代謝的主要器官,故尿中氨基酸的變化最能反應(yīng)肝、腎的生理狀態(tài)。另外,氨基酸還能反應(yīng)灼傷、傷寒等方面情況。植物體內(nèi)氨基酸含量對(duì)研究植物在不同條件下及不同生長發(fā)育時(shí)期氮代謝變化、植物對(duì)氮素的吸收、運(yùn)輸、同化及營養(yǎng)狀況等有重要意義。
測(cè)定原理:
氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)紫色化合物,在570 nm有特征吸收峰;通過測(cè)定570 nm吸光度,來計(jì)算氨基酸含量。
自備儀器及用品:
臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽、無水乙醇、冰和蒸餾水。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
堿性(AP)標(biāo)記的兔抗狗IgGAnti-TNFRSF1A Antibody去氧紫草素43043-74-9價(jià)格
辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗狗IgGAnti-TNFRSF1A Antibody靈芝酸的104759-35-5品牌
標(biāo)記的兔抗狗IgGAnti-TNFRSF1B Antibody新補(bǔ)骨脂異黃酮41060-15-5價(jià)格
Cy3標(biāo)記的兔抗狗IgGAnti-TNFRSF1B Antibody長春堿143-67-9說明書
Cy5標(biāo)記的兔抗狗IgGAnti-TNFRSF1B Antibody(原貨號(hào)PB0545)龍血素A119425-89-7品牌
Cy5.5標(biāo)記的兔抗狗IgGAnti-TNFRSF1B Antibody(原貨號(hào)PB0546)L-精74-79-3價(jià)格
Cy7標(biāo)記的兔抗狗IgGAnti-TNFRSF1B Antibody三七皂苷R280418-25-3說明書
PE-Cy3標(biāo)記的兔抗狗IgGAnti-TNFRSF1B Antibody紫檀芪537-42-8說明書
氨基酸(AA)含量微量法檢測(cè)試劑盒烯芐酯 98%大鼠促性釋放激素受體抗體(GNRHR-Ab)免疫試劑盒HHLA1蛋白抗體H1N1/H5N1/H3N2 nucleocapsid protein A型流感病核衣殼蛋白抗體
二烯1,3-丁二酯, 含200 ppm MEHQ穩(wěn)定劑, 95%大鼠促性釋放激素受體(GnRHR)免疫試劑盒心肌肌球蛋白重鏈抗體H1N1/H5N1/H3N2 nucleocapsid protein A型流感病核衣殼蛋白抗體
二烯1,4-丁二酯, 含100ppm MEHQ 穩(wěn)定劑, 95%大鼠促性釋放激素(GnRH)免疫試劑盒異質(zhì)性核糖核蛋白M抗體H1N1 Matrix Protein 2/Influenza A bp1 A型豬流感病H1N1-M2蛋白抗體
二烯1,3-丁二酯, 含500 ppm 對(duì)二酚(HQ)穩(wěn)定劑, 98%大鼠促?;鞍?ASP)免疫試劑盒附睪分泌蛋白4抗體H1N1 matrix protein 2 型流感病M2抗體
烯叔丁酯, 包含有200 ppm MEHQ阻聚劑, 99%大鼠促皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)免疫試劑盒鐵硫簇整合同源物2蛋白抗體H1N1 Matrix Protein 1 A型病H1N1蛋白抗體
烯丁酯 GR,99%大鼠促皮質(zhì)激素(ACTH)免疫試劑盒HIG1區(qū)域家族成員2A抗體H1N1 Hemagglutinin 2 型流感病血凝素抗體
烯叔丁酯 99%,含10-20 ppm MEHQ 作為穩(wěn)定劑大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)免疫試劑盒結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白抗體H1N1 Hemagglutinin 2 型流感病血凝素抗體
烯環(huán)己酯, 包含60 - 100 ppm MEHQ(單)穩(wěn)定劑,大鼠促卵泡素(FSH)免疫試劑盒高遷移率族蛋白B4抗體H1N1 Hemagglutinin 1/Influenza A bp1 型流感病血凝素抗體
二烯二乙二酯 96%大鼠促狀腺素受體(TSHR)免疫試劑盒硫肝素糖蛋白1抗體抗體H1N1 Hemagglutinin 1/HA probe 型流感病血凝素抗體
烯二乙氨乙酯, 包含100 ppm 吩噻, 99%大鼠促狀腺素釋放激素(TRH)免疫試劑盒叉頭蛋白J1抗體H Cadherin/CDH13 心臟鈣粘蛋白抗體
烯乙氧乙氧乙酯, >90%(GC),含1000ppmMEHQ穩(wěn)定劑大鼠促狀腺素(TSH)免疫試劑盒艾滋病病抗體GZMB/Granzyme B 顆粒B抗體
二烯二乙二酯 75%大鼠雌酮(E1)免疫試劑盒艾滋病病抗體GZMA/Granzyme A 顆粒A抗體
烯二氨乙酯 99%大鼠雌三(E3)免疫試劑盒艾滋病病抗體GYPB/CD235b 血型糖蛋白δ抗體
烯 N,N-二乙氨乙酯 95%大鼠雌激素硫轉(zhuǎn)移(SULT1E1)免疫試劑盒結(jié)合珠蛋白相關(guān)蛋白抗體GYG2 糖原蛋白2抗體
烯二氨乙酯 99%大鼠雌激素(E)免疫試劑盒L-組氨脫羧抗體GYG1 糖原蛋白1抗體
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