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貨號(hào) | GOY-01S6546 |
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選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 100管/96樣 |
檢測方法 | 微量法 |
貨號(hào) | GOY-01S6546 |
商品介紹:
測定意義
哺乳動(dòng)物CarE,也稱脂族酯酶(aliesterase),廣泛分布于組織和器官,屬于水解酶家族。CarE催化含酯鍵、酰胺鍵和硫酯鍵的內(nèi)源性與外源性物質(zhì)水解,但不能催化水解乙酰及其類似物。CarE參與脂質(zhì)運(yùn)輸和代謝,并且與多種藥物、環(huán)境毒物以及致癌物的解毒和代謝有關(guān),有機(jī)磷農(nóng)藥可結(jié)合并且抑制CarE活性。
測定原理:
CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固籃顯色;在450 nm光吸收增加速率,計(jì)算CarE活性。
自備儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
三氟化乙酸絡(luò)合物 98%DL-α-異丁酸 98%Anti-CK7 抗角蛋白7抗體
三氟化乙 46.5%BOC-L-纈 99%Anti-CK10 角蛋白10抗體
三氟化乙 98%BOC-D- 98%Anti-CK5+6 角蛋白5+6抗體
三氟化四絡(luò)合物 48-50%溶液1-芐基哌 97%Anti-CK6 角蛋白6抗體
三氟化乙絡(luò)合物 97%BOC-D-纈 98%Anti-CK8 角蛋白8抗體
三氟化甲絡(luò)合物 50-52 wt% BF3 巴豆酸 98%Anti-CKLFSF2 趨化素樣因子超家族成員2抗體
丹皮酚 99%Fmoc-beta- 99%Anti-CK1+5+10+14 高分子量角蛋白抗體
叔丁 GR,≥99.5% (GC)N-羥基硫代琥珀酰亞 98%Anti-CK-HMW 高分子量角蛋白抗體
羧酸酯酶(CarE)微量法檢測試劑盒2,6-二 98%大鼠白抗原DR(HLA-DR)免疫試劑盒高密度脂蛋白抗體GRB10 生長因子受體結(jié)合蛋白10抗體
2,6-二 99%大鼠白活化黏附因子(ALCAM)免疫試劑盒蛋白激底物相關(guān)蛋白抗體GRASP65 高爾體外周膜蛋白p65抗體
2,6-二氟 98%大鼠白三烯E4(LTE4)免疫試劑盒艾滋病病抗體GRAP2 生長因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接頭蛋白2抗體
2,6-二氟酰 97%大鼠白三烯D4(LTD4)免疫試劑盒流感病H3N2血凝素抗體Granzyme K 顆粒K抗體
2,6-二 99%大鼠白三烯C4(LTC4)免疫試劑盒人瘤病16型L2抗體Granzyme D/B/E/N/G/F/H 顆粒D/B/E/N/G/F/H抗體
駢三氮唑 99%大鼠白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒A型病H7N9 M1蛋白抗體GRAMD3/NS3TP2 型肝炎病-NS3反轉(zhuǎn)錄激活蛋白2抗體
駢三氮唑 CP,97%大鼠白介素9(IL-9)免疫試劑盒水蛭素抗體GRAMD2 GRAM結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體
D-海藻糖,無水 99%大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒副腫瘤綜合癥小腦變性相關(guān)蛋白抗體GPX4 過氧化4抗體
木瓜蛋白 ≥3 units/mg大鼠白介素7受體(IL-7R)免疫試劑盒植物熱休克蛋白93抗體GPX3 過氧化3
D-(+)-海藻糖 二水合物 from Saccharomyces cerevisiae, ≥99%大鼠白介素7(IL-7)免疫試劑盒重組人瘤病抗體GPX1 過氧化1
D-海藻糖,二水 分析標(biāo)準(zhǔn)品大鼠白介素6受體(IL-6R)免疫試劑盒長鏈烯脂酰輔A脫氫抗體GPVI/Glycoprotein VI 糖蛋白VI/六糖蛋白抗體
D-海藻糖,二水 用于和昆蟲培養(yǎng), ≥99%大鼠白介素6(IL-6)免疫試劑盒羥輔A脫氫β抗體GPV/Goose parvovirus 鵝細(xì)小病GPV抗體
D-海藻糖,二水 用于植物培養(yǎng), ≥99%大鼠白介素5(IL-5)免疫試劑盒三羥輔A裂解抗體GPSM2 G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白2抗體
肌,一水 BR大鼠白介素4(IL-4)免疫試劑盒高密度脂蛋白抗體GPSM1 G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白1抗體
無水肌 98%大鼠白介素35(IL-35)免疫試劑盒化三羥輔A還原抗體GPS1/CSN1 G蛋白通路抑制蛋白1抗體
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