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產(chǎn)品名稱:大鼠白細胞抗原DR(HLA-DR)elisa試劑盒
英文名稱:Rat leukocyte antigen-DR,HLA-DR ELISA kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液
選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
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具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果,酶標儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進行測試。
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
分揀連接蛋白13(SNX13)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 95% 費氏另類弧菌 100g
分揀連接蛋白17(SNX17)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 95% 黃曲霉 25g
微纖絲關(guān)聯(lián)蛋白4(MFAP4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 95% 枯草芽孢桿菌 500g
腦多巴胺神經(jīng)營養(yǎng)因子(CDNF)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) D,98% 蘇云金芽孢桿菌阿萊亞種 5g
髓細胞觸發(fā)受體2(TREM2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 食砜節(jié)桿菌 100g
細胞程序性死亡蛋白6(PDCD6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 熒光假單胞菌 1g
細胞程序性死亡蛋白6相互作用蛋白(PDCD6IP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 基利恩帚枝霉 25g
纖調(diào)蛋白(FMOD)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 異常威克漢姆酵母 5g
Ⅴ型膠原α2(COL5α2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97%(T) 金針菇F8909 1g
細胞色素P450家族成員1A2(CYP1A2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97%(T) 枯草芽孢桿菌 5g
C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白9(C1QTNF9)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥99% 犁頭霉屬 1g
角蛋白16(KRT16)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥99% 枯草芽孢桿菌 5g
層粘連蛋白γ1(LAMγ1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 黑曲霉 1g
Smad同源物2(Smad2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 賴氨酸芽胞桿菌屬 250mg
神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白1(NXPH1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 棉刺盤孢 5g
唾液酸酶2(SIAL2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 蘋果黑腐皮殼 1g
肽基精氨酸脫亞氨酶Ⅵ(PADI6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 米曲霉 5g
原肌球調(diào)節(jié)蛋白3(TMOD3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 20 wt. % suspension in THF 擴展青霉 100g
大鼠白細胞抗原DR(HLA-DR)elisa試劑盒冰凍切片b-葡糖苷酸酶活性染色 MCTS1(Malignant T cell-amplified sequence 1) 100 ul
細胞捺脂丙酸鹽脂酶活性染色 SLC25A4(ADP/ATP translocase 1) 100 ul
冰凍切片捺脂丙酸鹽脂酶活性染色 PLEKHO1(Pleckstrin homology domain-containing family O member 1) 100 ul
細胞總脂酶活性格莫瑞(Gomori)染色 GALC(Galactocerebrosidase) 100 ul
冰凍切片總脂酶活性格莫瑞(Gomori)染色 FAM214A(Protein FAM214A) 100 ul
全組織總脂酶活性格莫瑞(Gomori)染色 SERPINB13(Serpin B13) 100 ul
細胞抗酸性磷酸酶(TRAP)活性染色 PTGDR(Prostaglandin D2 receptor) 100 ul
冰凍切片抗酸性磷酸酶(TRAP)活性染色 ABCA7(ATP-binding cassette sub-family A member 7) 100 ul
石蠟切片摩羅利(MALLORY/PERLS)鐵(三價)染色 TCF3(Transcription factor E2-alpha) 100 ul
冰凍切片摩羅利(MALLORY/PERLS)鐵(三價)染色 HARS(Histidyl-tRNA synthetase, cytoplasmic) 100 ul
細胞摩羅利(MALLORY/PERLS)鐵(三價)染色 IKBKE(Inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase subunit epsilon) 100 ul
石蠟切片特恩布爾(TURNBULL)鐵(二價)染色 PKD2(Polycystin-2) 100 ul
冰凍切片特恩布爾(TURNBULL)鐵(二價)染色 IFIT1(Interferon-induced protein with tetRatricopeptide repeats 1) 100 ul
細胞特恩布爾(TURNBULL)鐵(二價)染色 ICAM-4(Intercellular adhesion molecule 4) 100 ul
石蠟切片皮爾斯(PERLS-DAB)非血紅素鐵(三價)強化染色 SDCBP(Syntenin-1) 100 ul
冰凍切片皮爾斯(PERLS-DAB)非血紅素鐵(三價)強化染色 ICAM-4(Intercellular adhesion molecule 4) 100 ul
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