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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>土壤系列>> 酸性土壤速效磷微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6906 |
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操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 100管/96樣 |
檢測(cè)方法 | 微量法 |
貨號(hào) | GOY-01S6906 |
商品介紹:
測(cè)定意義
速效磷是土壤中可被植物吸收的磷組分,包括全部水溶性磷、部分吸附態(tài)磷及有機(jī)態(tài)磷,土壤中速效磷是限制植物生長(zhǎng)主要因子之一。
測(cè)定原理
用雙酸法提取酸溶性磷和吸附態(tài)磷,用鉬銻抗比色法測(cè)定。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
蛋白激AKT1,2,3抗體Human MAK ELISA Kit小鼠β內(nèi)酰抑制劑(BLI)ELISA試劑盒,
帕金森病相關(guān)蛋白ATP13A2抗體Human MAGED2 ELISA Kit小鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒,
肌側(cè)索硬化蛋白2抗體Human MAGED4 ELISA Kit小鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)ELISA試劑盒,
化擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體Human MAGEF1 ELISA Kit小鼠糖原化同工BB(GP-BB)ELISA試劑盒,
?;oA脫氫長(zhǎng)鏈抗體Human MAGEH1 ELISA Kit兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒,
分裂周期蛋白5抗體Human MBD2 ELISA Kit基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
β淀粉樣肽/Aβ42抗體Human MC3R(Melanocortin receptor 3) ELISA Kit封閉抗體(BA)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
ADCK4蛋白抗體Human MBD3(Methyl-CpG-binding domain protein 3) ELISA Kit布魯氏抗體IgG(Brucella Ab IgG)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
酸性土壤速效磷微量法檢測(cè)試劑盒豬活化蛋白C(APC)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
山羊血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)免疫試劑盒*直銷
牛胱天蛋白8(Casp-8)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)免疫試劑盒*直銷
小鼠幽門螺旋桿菌抗體(IgM)免疫試劑盒*直銷
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大鼠β羥丁酸(βOHB)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
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