操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。

商品屬性：

商品介紹：

測定意義

PDH（EC 4.1.1.1）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是丙酮酸脫氫酶復(fù)合體(PDHC)催化丙酮酸氧化脫羧的限速酶，催化丙酮酸脫梭生成-TPP，把糖酵解和三羧酸循環(huán)連接起來。

測定原理

PDH催化丙酮酸脫氫，同時還原WST-8產(chǎn)生黃色物質(zhì)，從而導(dǎo)致450nm光吸收的增加。

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

實驗方法學(xué)：

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

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丙酮酸脫氫酶（PDH)可見分光光度法 99.99% metals basis化蛋白激C抗體 PKC εBMP4  骨形態(tài)發(fā)生蛋白4抗體

2-乙蒽醌 97%血小板源性生長因子C抗體BMP11  骨形態(tài)發(fā)生蛋白11抗體

鄰氧 CP,97%血小板源性生長因子D(脊髓源性生長因子B)BMP10  骨形態(tài)發(fā)生蛋白10抗體

對氧 97.0%非典型蛋白激C特定相互作用蛋白抗體BMP1  骨形態(tài)發(fā)生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內(nèi)切抗體

4-異酯 98%原鈣粘蛋白13抗體BMI-1/PCGF4  組蛋白相關(guān)Bmi1抗體

3,4-二異酯 97% 26S蛋白調(diào)節(jié)亞型抗體Bmf/Bcl2 modifying factor  Bcl2蛋白修飾因子抗體

3-氨-4-戊  98%原鈣粘蛋白β11抗體BMAL1  芳香烴受體核轉(zhuǎn)位蛋白樣1抗體

2-酚 99%軸周蛋白PRX抗體Blood Group Lewis a  血型抗原Lewis A抗體

對 98%豬藍(lán)耳病病GP5蛋白抗體Blood Group Lewis a  血型Lewis a抗體

2- 98%p21激活激1抗體Blood Group Kell Antigen/CD238  凱爾血型糖蛋白CD238抗體

1,4-二 97%蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)抗體Blood Group Antigen Precursor  血型抗原前體蛋白抗體

2,2'-二硫雙(5-硝吡) 97%脯氨酰羥化抗體BLNK  B淋巴連接蛋白抗體