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選擇ELISA試劑盒應從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經濟性全面評價。
產品名稱:TM elisa試劑盒價格
英文名稱:TM elisa Kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液
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具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經費。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數;
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結果要在15-30 min內完成,定性測定用肉眼判讀試驗結果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
體外非細胞系統(tǒng)血紅素氧合酶-1(HEME OXYGENASE-1)活性比色法定量 PCGF1 (Polycomb group RING finger protein 1) 100 ul
細胞血紅素氧合酶-1(HEME OXYGENASE-1)活性熒光定量 PRDM1 (PR domain zinc finger protein 1) 100 ul
組織血紅素氧合酶-1(HEME OXYGENASE-1)活性熒光定量 PAQR5 (Membrane progestin receptor gamma) 100 ul
體外非細胞系統(tǒng)血紅素氧合酶-1(HEME OXYGENASE-1)活性熒光定量 MOCOS(Molybdenum cofactor sulfurase) 100 ul
細胞血紅素氧合酶-2(HEME OXYGENASE-2)活性比色法定量 DHTKD1 (Probable 2-oxoglutarate dehydrogenase E1 component DHKTD1, mitochondrial) 100 ul
組織血紅素氧合酶-2(HEME OXYGENASE-2)活性比色法定量 PROKR1 (Prokineticin receptor 1) 100 ul
體外非細胞系統(tǒng)血紅素氧合酶-2(HEME OXYGENASE-2)活性比色法定量 PIPOX (Peroxisomal sarcosine oxidase) 100 ul
細胞血紅素氧合酶-2(HEME OXYGENASE-2)活性熒光定量 ADCYAP1(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide) 100 ul
組織血紅素氧合酶-2(HEME OXYGENASE-2)活性熒光定量 PROSER1 (Proline and serine-rich protein 1) 100 ul
體外非細胞系統(tǒng)血紅素氧合酶-2(HEME OXYGENASE-2)活性熒光定量 PLAC1 (Placenta-specific protein 1) 100 ul
細胞硫氧還蛋白還原酶(thioredoxin reductase)活性比色法定量 PRLR(Prolactin receptor) 100 ul
組織硫氧還蛋白還原酶(thioredoxin reductase)活性比色法定量 PRLHR(Prolactin-releasing peptide receptor) 20 ul
細胞硫氧還蛋白還原酶1(cytosolic thioredoxin reductase 1)活性比色法定量 PGM5 (Phosphoglucomutase-like protein 5) 100 ul
組織硫氧還蛋白還原酶1(cytosolic thioredoxin reductase 1)活性比色法定量 PGM3 (Phosphoacetylglucosamine mutase) 20 ul
細胞硫氧還蛋白還原酶2(mito thioredoxin reductase 2)活性比色法定量 PRPS2 (Ribose-phosphate pyrophosphokinase 2) 100 ul
組織硫氧還蛋白還原酶2(mito thioredoxin reductase 2)活性比色法定量 PEAR1 (Plaet endothelial aggregation receptor 1) 100 ul
TM elisa試劑盒價格angiotension I血管緊張素Ⅰ種屬: Pleurotus│columbinus哥倫比亞側耳
angiotensionⅡ血管緊張素Ⅱ種屬: Streptomyces│badius深瘡痂鏈霉菌
angiotension Ⅱ receptor 1血管緊張素Ⅱ受體1種屬: Campylobacter jejuniNCTC12662
angiotension Ⅱ receptor 1 antibody血管緊張素Ⅱ受體1抗體種屬: Auricularia│polytricha (Mont.) Sacc.大平網(毛木耳)
angiotension Ⅱ receptor 2 antibody血管緊張素Ⅱ受體2抗體種屬: Termitomyces│sp.蟻巢傘屬
angiotensinogen血管緊張素原種屬: Coprinus│comatus (O.F. Müll.) Pers.雞腿蘑
Angiotensin converting enzyme血管緊張素轉化酶種屬: Dictyophora│indusiata (Vent.) Desv.長裙竹蓀(白竹蓀)
Angiotensin Converting Enzyme 2血管緊張素轉化酶2種屬: Streptomyces│sp.鏈霉菌 (吸水類群)
Endothelium-Derived Hyperpolarizing Factor血管內皮超極化因子種屬: Diaporthe│citri F.A. Wolf柑橘擬莖點霉(無法提供)
VE-cadherin血管內皮鈣粘蛋白種屬: Escherichia│coli大腸埃希氏菌DH5a/phA3G-E259Q-HA
Vascular Endothelial cell Growth Factor A血管內皮生長因子A種屬: Tricholomopsis│nigra (Petch) Pegler黑鱗擬口蘑
Vascular Endothelial cell Growth Factor B血管內皮生長因子B種屬: Hericium│erinaceus (Bull.) Pers.猴頭菌?50043
Vascular Endothelial cell Growth Factor C血管內皮生長因子C種屬: Pestalotiopsis│theae (Sawada) Steyaert茶盤多毛孢
endothelial protein C receptor血管內皮細胞蛋白C受體種屬: Mycosphaerella│sp.球腔菌屬
Vascular Endothelial cell Growth Factor血管內皮細胞生長因子種屬: Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.平菇(蘇引6號)
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
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