當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>進口elisa試劑盒>>人elisa試劑盒>> 48T/96TeNOS-3 elisa試劑盒價格
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產(chǎn)品名稱 | eNOS-3 elisa試劑盒價格 |
英文名稱 | eNOS-3 elisa Kit |
貨號 | GOY-H7393 |
實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
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樣品收集、處理及保存:
1).細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細胞:用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標儀在450 nm處測吸光值。
eNOS-3 elisa試劑盒價格操作步驟:
1)運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
茄病鐮刀菌(斜面)ALT1 谷丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶1抗體100 ul
小麥褐斑長蠕孢霉(不提供)Eph receptor A2+A3+A4 內(nèi)皮細胞受體蛋白酪氨酸激酶A2+A3+A4抗體100 ul
尖孢鐮刀菌黃瓜?;停ㄐ泵妫?/font>phospho-Eph receptor A2+A3+A4 (Tyr588 + Tyr596) 磷酸化內(nèi)皮細胞受體蛋白酪氨酸激酶A2+A3+A4抗體100 ul
尖鐮孢菌(斜面)phospho-EPH A3+A4+A5 ( Tyr779) 磷酸化內(nèi)皮細胞受體蛋白酪氨酸激酶A3+A4+A5抗體100 ul
木蹄層孔菌(斜面)FLAP/5-lipoxygenase activating protein 5脂氧合酶激活蛋白抗體100 ul
禾谷鐮刀菌(斜面)IKK alpha + IKK beta KB抑制蛋白激酶α/β抗體100 ul
猴頭菌(北京猴頭)(斜面)MC3 Receptor 黑素皮質(zhì)素受體3抗體100 ul
細極鏈格孢(斜面)PDGF AB+BB 血小板源性生長因子AB+BB抗體100 ul
葡萄殼小圓孢菌CPLA2 胞漿型磷脂酶A2抗體100 ul
油菜菌核病菌(斜面)TIRAP 白細胞介素1受體銜接蛋白抗體100 ul
芽枝孢霉phospho-TIRAP(Tyr86) 磷酸化白細胞介素1受體銜接蛋白抗體100 ul
鏈格孢(斜面)TNIP2/ABIN2/TNFAIP3 interacting protein 2 腫瘤壞死因子α誘導蛋白3相互作用蛋白2抗體100 ul
互隔交鏈孢霉(斜面)Azurocidin/Cationic antimicrobial protein 37 肝素結(jié)合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體100 ul
人參鏈格孢(斜面)AGPB/Alpha 1 acid glycoprotein 2 α1酸性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2)100 ul
球孢白僵菌(斜面)RHBDD3 垂體瘤細胞凋亡抗體20 ul
隆紋黑蛋巢菌(斜面)RIP1 受體相互作用蛋白激酶1抗體25 ml
蟬花1-13RNF122 環(huán)指蛋白122抗體125 ml
茄絲核菌RNF36 環(huán)指蛋白36抗體25 ml
隱丹參;Cryptotanshin 35825-57-1 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
小白菊內(nèi)酯;Parthelide 20554-84-1 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
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苦玄參苷IA;Picfeltarraen 97230-47 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
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