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貨號	GOY-01S6592

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	甲基檸檬酸合酶(MCS）可見分光光度法檢測試劑盒
規(guī)格	50管/48樣
檢測方法	可見分光光度法
貨號	GOY-01S6592

商品介紹：

測定意義

MCS廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞的線粒體基質(zhì)中，與檸檬酸合酶（CS）共同參與三羧酸循環(huán)的調(diào)節(jié)。

測定原理：

MCS催化丙酰CoA和草酰乙酸產(chǎn)生甲基檸檬酰，進一步水解產(chǎn)生甲基檸檬酸；該反應(yīng)促使無色的DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB，在 412nm處有特征吸光值。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、無水乙醇和蒸餾水

實驗方法學：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

抗抗體 IgM(間接法二步法)Anti-Mevalonate Kinase Antibody人血紅蛋白C（HbC）elisa定量檢測試劑盒

大鼠分泌型磷脂A2Anti-MFAP5 Antibody人血管內(nèi)皮生長因子受體3（VEGFR3/Flt4）elisa定量檢測試劑盒

兔骨形成蛋白Anti-MIA Antibody人嗅素4（OLFM4）elisa定量檢測試劑盒

人干擾素調(diào)節(jié)因子Anti-MGST3 Antibody人肥胖抑制素（OB）elisa定量檢測試劑盒

鯉魚卵黃蛋白原Anti-MGST2 Antibody人性別決定區(qū)Y框蛋白3（SOX3）elisa定量檢測試劑盒

小鼠CD3分子Anti-MIA2 Antibody人蛋白3（PR3）elisa定量檢測試劑盒

魚類促性腺釋放Anti-MIA Antibody人嗜酸粒趨化因子受體（ECFR）elisa定量檢測試劑盒

兔骨保護素Anti-MID1 Antibody人熱休克蛋白90（HSP-90）elisa定量檢測試劑盒

甲基檸檬酸合酶(MCS）可見分光光度法檢測試劑盒噁唑 98%跨膜蛋白TMED4抗體

2-噻吩乙酰 98%狀受體相關(guān)蛋白3抗體

4-辛炔 99%味覺受體蛋白家族2亞9抗體

十八 ≥97.0% (GC)肥大類胰蛋白β2

草酰 98%化酪氨激B抗體

油 99%粘附分子1抗體

油分析標準品，≥99.0% (GC)跨膜蛋白16A/鈣激活離子通道抗體

1,7-辛二炔 98%腫瘤壞死因子-α抗體

十八烷 99%腫瘤蛋白P53誘導蛋白11抗體

十八烷分析標準品，≥99.5% (GC)味覺2型受體蛋白家族49抗體

十八烷 Standard for GC, ≥99.5% (GC)早期未分化視網(wǎng)膜及晶狀體蛋白EURL抗體

酮三化膦 99%特異激底物蛋白抗體

丁位辛內(nèi)酯 98%微管相關(guān)同源蛋白TPX2抗體

4-戊烯 95%神經(jīng)死亡誘導蛋白激抗體

鍺試劑 97%微管蛋白β tubulin抗體 Tubulin β

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。