當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>進(jìn)口elisa試劑盒>>人elisa試劑盒>> 48T/96TTNF-β elisa試劑盒規(guī)格
公司采用的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無效包退包換,公司提供免費(fèi)代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱 | TNF-β elisa試劑盒規(guī)格 |
英文名稱 | TNF-β elisa Kit |
貨號 | GOY-H7711 |
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
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樣品收集、處理及保存:
1).細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測吸光值。
TNF-β elisa試劑盒規(guī)格操作步驟:
1)運(yùn)用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
組織谷氨酰胺酶(glutaminase)活性比色法定量 MKL2 (MKL/myocardin-like protein 2) 20 ul
植物谷氨酰胺酶(glutaminase)活性比色法定量 CENPU (Centromere protein U) 100 ul
細(xì)菌谷氨酰胺酶(glutaminase)活性比色法定量 MLIP (Muscular LMNA-interacting protein) 100 ul
谷氨酰胺合酶(glutamine synthetase)活性酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量 MSC(Musculin) 100 ul
谷氨酰胺脫羧酶 MOB2 (MOB kinase activator 2) 100 ul
鳥氨酸脫羧酶(Ornithine decarboxylase) PRX(Periaxin) 100 ul
細(xì)胞甘油-3-磷酸脫氫酶(Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase)總活性比色法定量 MAZ (Myc-associated zinc finger protein) 100 ul
組織甘油-3-磷酸脫氫酶(Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase)總活性比色法定量 MOAP1 (Modulator of apoptosis 1) 100 ul
細(xì)胞甘油-3-磷酸脫氫酶-1(Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-1)活性光譜法定量 MPHOSPH10 (U3 small nucleolar ribonucleoprotein protein MPP10) 100 ul
組織甘油-3-磷酸脫氫酶-1(Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-1)活性光譜法定量 MKX(Homeobox protein Mohawk) 20 ul
細(xì)胞甘油-3-磷酸脫氫酶-2(Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-2)活性比色法定量 MSGN1 (Mesogenin-1) 100 ul
組織甘油-3-磷酸脫氫酶-2(Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-2)活性比色法定量 MPV17L2 (Mpv17-like protein 2) 20 ul
細(xì)胞甘油激酶(Glycerol kinase)活性酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量 MAVS (Mitochondrial antiviral-signaling protein) 100 ul
組織甘油激酶(Glycerol kinase)活性酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量 MBLAC2 (Metallo-beta-lactamase domain-containing protein 2) 100 ul
半乳糖基轉(zhuǎn)移酶(galactosyl transferase) MTCH1 (Mitochondrial carrier homolog 1) 20 ul
動物多酚氧化酶(polyphenol oxidase;PPO)活性比色法定量 LTK(Leukocyte tyrosine kinase receptor) 100 ul
HBxAb乙型肝炎病毒X抗體種屬: Toxoplasma│gondii弓形蟲(GJO-3株)
hepatitis B virus surface antigen乙型肝炎病毒表面抗原種屬: Peziza│sp.盤菌
Hepatitis B “core ” antigen乙型肝炎病毒核心抗原種屬: Labryssp.雙頭菌屬
HBV preS1Ab乙型肝炎病毒前S1抗體種屬: Haematonectria│haematococca (Berk. & Broome) Samuels & Rossman茄病鐮刀菌(不提供)
HBV preS2Ab乙型肝炎病毒前S2抗體種屬: Myroides│sp.類香味菌
HBV preSAb乙型肝炎病毒前S抗體種屬: Xanthomonas│sp.黃單孢菌
HBV-DNA乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸種屬: Pestalotiopsis│monochaetioides單毛擬盤多毛孢
iso-Hyd異丙腎上腺素種屬: Salegentibacter│salarius鹽需鹽桿菌
isocitrate dehydrogenase異檸檬酸脫氫酶種屬: Salmonella│bunnik布尼克沙門氏菌
isocitrate dehydrogenase 1異檸檬酸脫氫酶1種屬: Aneurinibacillus│terranovensis新地站解硫胺素芽孢菌
heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies;anti-RA33-antibody異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物;抗RA33抗體種屬: Ascochyta│sp.殼二胞屬
Oncostatin M抑瘤素M種屬: Gymnopilus│junonius (Fr.) P.D. Orton橙鱗傘7
gastric inhibitory polypeptide抑胃肽種屬: Alpharetrovirus│Avian Rous sarcoma virus禽Rous肉瘤病病毒
Inhibin抑制素A種屬: Phomopsis│versoniana Sacc.石榴干腐菌
inhibin B抑制素B種屬: Trichosporon│lignicola木生絲孢酵母
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