測定步驟：

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋：將試劑三用蒸餾水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。

3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。

5、 樣本測定（在96孔板中依次加入下列試劑）

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明！

商品介紹

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。

所需的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)！

1、樣本制備

① 組織樣本：

取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。

【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取

② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本：

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；

12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10

4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。

注意事項(xiàng)：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于 1，建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用（10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；

（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min）。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般

將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。

D-谷 98%苯磺隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品，95%Anti-Vimentin/Cy3   熒光素Cy3標(biāo)記波形蛋白抗體IgG

L-谷-5-叔丁酯-1-甲酯鹽酸鹽 95%線磷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，96%Anti-VIP/FITC  熒光素標(biāo)記血管活性腸肽抗體蛋白抗體IgG

甘芐酯鹽酸鹽 98%標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,u=3%,溶劑:酮Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT)/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素/腹脂素/內(nèi)肥素 抗體IgG

甘芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽 98%標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,u=5%,溶劑:酮Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT) hu、 mo、 rat、MK /FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(N端抗體)IgG

甘氨酰鹽酸鹽 98%異標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=3%（劇品）Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT) Human /FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素（N端抗體）IgG

L-谷二甲酯鹽酸鹽 98%異標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=5%（劇品）Anti-Visfatin-2(CT)/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素（C端抗體）IgG

甘叔丁酯鹽酸鹽 98%a-硫丹標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=3%,基體:苯Anti-VPS18/FITC  熒光素標(biāo)記空泡分選蛋白18抗體IgG

L-谷-γ-芐酯 98%a-硫丹標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=5%Anti-VR1/FITC  熒光素標(biāo)記辣椒素受體抗體IgG

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