當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>進口elisa試劑盒>>大鼠elisa試劑盒>> 48T/96T大鼠骨堿性磷酸酶(BALP)elisa試劑盒
實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
公司采用的全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產品齊全,質量可靠。
產品名稱 | 大鼠骨堿性磷酸酶(BALP)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Rat bone alkaline phosphatase,BALP ELISA Kit |
貨號 | GOY-R74235 |
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樣品收集、處理及保存:
1).細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在450 nm處測吸光值。
骨鈣素(OC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 丁酸梭菌(20-30天) 500g
骨鈣素(OC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98+% 異常漢遜酵母 1g
補體成分3(C3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98+% 土星擬威爾酵母subsufficiens變種 5g
單核細胞趨化蛋白1(MCP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 塔賓曲霉 100g
緩激肽(BK)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 托魯斯山鏈霉菌 25g
干擾素γ(IFNγ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 香菇 5g
肝細胞生長因子(HGF)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 中慢生華癸根瘤菌 1g
尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶5(NOX5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 大腸埃希菌 25g
基質金屬蛋白酶9(MMP9)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 納西桿菌 5g
甲狀旁腺激素(PTH)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 白靈菇 100g
組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 假單胞菌 25g
脂蛋白關聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 殼囊孢屬 5g
堿性成纖維細胞生長因子(FGF2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 96% 大腸埃希菌 100g
巨噬細胞炎性蛋白相關蛋白1(MRP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 96% 大腸埃希氏菌 25g
內皮型一氧化氮合酶(NOS3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 96% 匍枝根霉(黑根霉) 500g
甲狀腺素受體β(THRβ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 解烴棒桿菌 1g
血管細胞粘附分子1(VCAM1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 草假單胞菌 5g
熱休克蛋白β2(HSPβ2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 釀酒酵母 1g
大鼠骨堿性磷酸酶(BALP)elisa試劑盒石蠟切片茜素紅(ALIZARIN RED S)鈣染色 GTPBP2 100 ul
冰凍切片茜素紅(ALIZARIN RED S)鈣染色 GTPBP4 100 ul
細胞茜素紅(ALIZARIN RED S)鈣染色 GTSE1 100 ul
全組織茜素紅(ALIZARIN RED S)鈣染色 GUCY1A3 100 ul
DRP-1蛋白表達 GTPBP5 100 ul
OPA-1蛋白表達 GUCY1B3 100 ul
MFN-1(MITOFUSIN) 蛋白表達 GTF2H3 20 ul
MFN-2蛋白表達 GTF2H2C 100 ul
PINK-1蛋白表達 GTF2H5 100 ul
PARKIN蛋白表達 GSTM4 100 ul
FIS-1蛋白表達 GSTO2 100 ul
ENDOPHILIN蛋白表達 GSTM5 100 ul
BAD蛋白表達 GSTZ1 100 ul
?體外肌動蛋白(ACTIN)結合分子(binding molecules) GSTT2B 100 ul
體外波形蛋白(Vimentin)結合分子(binding molecules) GSX1 100 ul
體外微管蛋白(tubulin)結合分子(binding molecules) GRK3 100 ul
操作步驟:
1)運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應當即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
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