當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>光合作用系列>> 果膠甲酯化程度可見分光光度法檢測試劑盒
貨號 | GOY-01S7012 |
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操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/48樣 |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
貨號 | GOY-01S7012 |
商品介紹:
測定意義
植物細胞壁中的果膠是植物初生細胞壁的主要成分,除了起結(jié)構(gòu)支撐、物質(zhì)運輸?shù)茸饔猛?,還具有抵抗逆境的作用。果膠甲酯化程度影響了細胞壁的堅韌程度及其抗性。
測定原理
果膠甲酯鍵經(jīng)皂化處理后釋放出甲醇,甲醇與2,4-戊二酮反應(yīng)顯色,在412nm下測定吸光值;同時半乳糖醛酸在70℃下與濃硫酸反應(yīng)生成5-甲?;?2-呋喃甲酸,5-甲酰基-2-呋喃甲酸與3,5-二甲基反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì),在450nm下有最大吸光值。以甲醇生成量與半乳糖醛酸含量的比值代表果膠甲酯化程度。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、酶標儀、96孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水、硫酸。
實驗方法學:
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
四己基氫銨 用于離子色譜, ≥99.0% (T)N,N'-二環(huán)己基碳二亞 99.0%Anti-CD74/MHC II CD74抗體
N,N,N',N'-四甲基-1,3-二 99%N,N'-琥珀酰亞基碳酸酯 98%Anti-CLEC2D/OCIL CLEC2D蛋白抗體
N,N,N',N'-四甲基-1,3-二 97%4-二甲吡 99%Anti-CD80/B7-1 激分子B7-1蛋白抗體
2,4,5-三氯苯 分析標準品,99%4,4'-二甲氧基三苯基氯 98%Anti-CD71/TFR 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體
1,2,3,4-四氯苯 分析標準品,98%4,5-二基咪唑 98%Anti-B7-1/CD80 激分子B7-1蛋白抗體
5-硫代-D-葡萄糖 96%4,5-二基咪唑 99%Anti-CD73 胞漿-5′-核苷酸-Ⅱ抗體
三溶液 50%溶液二吡咯烷基(N-琥珀酰亞氨氧基)碳六氟鹽 98%Anti-CD79A/IGBP-1 球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體
二十三烷 分析標準品,99.5%4-(4,6-二甲氧基三)-4-甲基嗎啉鹽酸鹽 97%Anti-CD82/KAI1 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1抗體
果膠甲酯化程度可見分光光度法檢測試劑盒大鼠肝細胞生長因子激活物(HGFA)免疫試劑盒進口、組裝
豬雌二醇(E2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
大鼠分泌型磷脂A2(sPLA2)免疫試劑盒*直銷
大鼠清除受體富含半胱1型蛋白M130/CD163分子,CD163 免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
雞L苯丙解氨(PAL)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
綿羊中性粒細胞明膠相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)免疫試劑盒*直銷
大鼠髓過氧化物(MPO)免疫試劑盒進口、組裝
3氧代5α類固醇4脫氫2(SRD5A2)免疫試劑盒進口、分裝
瞬態(tài)電壓感受器陽離子通道,子類V,成員4(TrpV4)免疫試劑盒進口、組裝
牛胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)免疫試劑盒*直銷
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