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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>光合作用系列>> 果膠裂解酶微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S7015 |
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商品介紹
測(cè)定意義 果膠裂解酶(EC4.2.2.10)是果膠酶的重要組成部分,是一種能降解植物細(xì)胞壁,導(dǎo)致植物組織軟化甚至死亡的解聚酶,來源比較廣泛,主要來源于微生物,可用于果汁、果酒的澄清,提高水果出汁率,植物病毒的純化,紙漿的漂白和紡織品的生物精煉,在減少環(huán)境污染和降低能源消耗方面具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。 測(cè)定原理: 果膠裂解酶作用于果膠中的α-1,4糖苷鍵,生成在還原端C4和C5之間位置具有不飽和鍵的不飽和寡聚半乳糖醛酸,在235nm處有特征吸收峰。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器: 天平、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿、恒溫水浴鍋。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S7015 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
鋅,七水 ACS, 99%乙苯標(biāo)準(zhǔn)溶液1000μg/ml,溶劑:甲Anti-BrdU/FITC(Bromodeoxyuridine) 熒光素標(biāo)記兔抗溴脫氧尿苷抗體IgG
鋅,七水 植物培養(yǎng)級(jí),99.5%乙苯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1 mg/ml in methanolAnti-BrdU/FITC 熒光素標(biāo)記溴脫氧尿苷抗體IgG
氯化鋅 AR,98%乙基汞標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,溶劑:甲苯Anti-SMARCA4/SNF2 beta/FITC 熒光素標(biāo)記抑癌基因SNF2β抗體IgG
氯化鋅 CP,98%乙基汞標(biāo)準(zhǔn)溶液2.04mg/LAnti-BRMS-1/FITC 熒光素標(biāo)記癌轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體IgG
氯化鋅 GR甲標(biāo)準(zhǔn)溶液 100mg/L,溶劑:水Anti-BTG2/TIS21/FITC 熒光素標(biāo)記B遷移基因2抗體IgG
氯化鋅 PT甲標(biāo)準(zhǔn)溶液1.20-1.43mg/LAnti-Brucella/FITC 熒光素標(biāo)記抗布魯氏菌抗體IgG
氯化鋅 ACS氟離子(F-)標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L,溶劑:水Anti-Brucella/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記抗布魯氏菌抗體IgG
氯化鋅 分子生物學(xué)級(jí),≥98.0% (AT)alpha-六六六標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,溶劑:甲Anti-Brucella/Biotin 標(biāo)記抗布魯氏菌抗體IgG
果膠裂解酶微量法檢測(cè)試劑盒山羊白介素10(IL-10)免疫試劑盒*直銷
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中心體紡錘體極相關(guān)蛋白1(CSPP1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
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