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選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
產(chǎn)品名稱:大鼠α-輔肌動蛋白1(ACTN-1)elisa試劑盒
英文名稱:Rat α-Actinin 1, ACTN-1 ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液?
具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。?
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進行測試。
間溴苯乙 28229-69-8鹽酸細胞間粘附分子1(ICAM1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
1-氨基海因鹽酸鹽 2827-56-7多索茶堿胰島素樣生長因子1(IGF1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
1-氨基海因鹽酸鹽 2827-56-7烏拉地爾頭蛋白(NOG)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
2,6-二甲基-4H-4-亞吡喃基二 28286-88-6比卡魯胺載脂蛋白C1(APOC1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
5-羥基-1-四氫萘酮 28315-93-7泛昔洛韋10kDa干擾素γ誘導(dǎo)蛋白(IP10)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)99%
5-羥基-1-四氫萘酮 28315-93-7替米沙坦嗅素4(OLFM4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)99%
(3S)-3-(芴甲氧羰基氨基)-5-氧代-5-(三苯甲基氨基)戊酸 283160-20-3奧沙拉秦鈉纖維介素蛋白(FGL2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)96%
2-溴-9,9-二甲基芴 28320-31-2伊曲康唑鮭魚降鈣素(SCT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)>98%
2-溴-9,9-二甲基芴 28320-31-2咪喹莫特末端補體復(fù)合體C5b-9(C5b-9)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)>98%
11-溴十一酸 2834-05-1
富馬酸福莫特羅IgG-Fc片段低親和力受體Ⅲb(FcγR3B)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
11-溴十一酸 2834-05-1
鹽酸吡格列酮硬骨素(SOST)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
11-溴十一酸 2834-05-1
去氧氟尿苷補體因子I(CFI)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
氯二酐 2834-23-3洛索洛芬鈉β-乳球蛋白(βLg)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
氯二酐 2834-23-3奈韋拉平心肌型蘭尼定受體2(RYR2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
氯二酐 2834-23-3普羅胺血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFA)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Brevibacterium flavum
犬維生素K1(VK1)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
人維生素K1(VK1)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
小鼠維生素K1(VK1)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Trichosporon behrendii Lodder et Kreger-van Rij
植物維生素K1(VK1)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
大鼠維生素K1(VK1)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Mucor racemosus
犬組胺(HIS)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Rhodopseudomonas palustris (Molisch) van Niel
豚鼠組胺(HIS)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Escherichia coli
大鼠α-輔肌動蛋白1(ACTN-1)elisa試劑盒細胞BLK激酶活性定量(A/B/C) CAPS2 (Calcyphosin-2) 100 ul
組織BLK激酶活性定量(A/B/C) CCIN (Calicin) 1 Pack
細胞BMK激酶活性定量(A/B/C) CAMSAP1 (Calmodulin-regulated spectrin-associated protein 1) 100 ul
組織BMK激酶活性定量(A/B/C) AP1M1(AP-1 complex subunit mu-1) 100 ul
細胞BTK激酶活性定量(A/B/C) COMTD1 (Catechol O-methyltransferase domain-containing protein 1) 100 ul
組織BTK激酶活性定量(A/B/C) Q1 (Calsequestrin-1) 100 ul
細胞C-KIT激酶活性定量(A/B/C) CTNND1 (Catenin delta-1) 20 ul
組織C-KIT激酶活性定量(A/B/C) CTCF (Transcriptional repressor CTCF) 100 ul
細胞C-MET激酶活性定量(A/B/C) CTNNBIP1 (Beta-catenin-interacting protein 1) 100 ul
組織C-MET激酶活性定量(A/B/C) CBR1 (Carbonyl reductase [NADPH] 1) 1 Kit
細胞CSK激酶活性定量(A/B/C) CTSE (Cathepsin E) 100 ul
組織CSK激酶活性定量(A/B/C) CPS1(Carbamoyl-phosphate synthase [ammonia], mitochondrial) 100 ul
細胞CSF1R激酶活性定量(A/B/C) CPVL (Probable serine carboxypeptidase CPVL) 1Kit
組織CSF1R激酶活性定量(A/B/C) AP2B1(AP-2 complex subunit beta) 100 ul
細胞CLK1激酶活性定量(A/B/C) CARHSP1 (Calcium-regulated heat-stable protein 1) 100 ul
組織CLK1激酶活性定量(A/B/C) BRD4(Bromodomain-containing protein 4) 100 ul
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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