選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評價。
產(chǎn)品名稱：cGMP elisa試劑盒廠家
英文名稱：cGMP elisa Kit
規(guī)格：48T/96T
保存： 2-8℃（頻繁使用時）；-20℃（長時間不用時）。
有效期： 6 個月(4℃)；12 個月（-20℃）。
用途： 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
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具有如下優(yōu)點：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
五、性價比非常好，節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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注意事項：
1加樣：
①實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實驗室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
抗精核蛋白；HP3E2EPF  泛素交聯(lián)酶抗體100 ul

抗嗎啡小鼠雜交瘤細(xì)胞；D7E2F8  轉(zhuǎn)錄因子E2F8抗體100 ul

抗孕酮雜交瘤細(xì)胞；P01E2 tag  E2 tag標(biāo)簽抗體20 ul

抗人絨毛膜促性腺激素α雜交瘤細(xì)胞；H80XHPV16 E7 protein  人瘤病毒16型E7抗體100 ul

抗睪酮小鼠雜交瘤細(xì)胞；T01ADAMTS9  整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶9型抗體100 ul

抗人絨毛膜促性腺激素b雜交瘤細(xì)胞；H10XADAMTSL1  整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶樣1蛋白抗體100 ul

抗人絨毛膜促性腺激素雜交瘤細(xì)胞；HN4EAAT1/Glast  膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸運載蛋白1抗體100 ul

小鼠胚胎細(xì)胞；SC-1EAAT2  膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸運載蛋白2抗體100 ul

抗乙型肝炎病毒表面抗原單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株；HBS-r6EAAT3  膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸運載蛋白3抗體(神經(jīng)/上皮細(xì)胞谷氨酸運載蛋白)100 ul

抗丙型肝炎病毒核心抗原單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株；HCV-C39EBNA 3A  EB病毒核抗原-3A抗體100 ul

抗丙型肝炎病毒NS3抗原單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株；HCVNS3-57ADAMTSL3  整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶樣2蛋白抗體100 ul

抗丙型肝炎病毒膜區(qū)抗原單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株；HCVEA-246ECE1  內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗體20 ul

抗丙型肝炎病毒NS5抗原單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株；NS5ECE2  內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2抗體100 ul

抗呼吸道合胞病毒單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株；RSV-4C1ECG2  食道癌相關(guān)基因抗體20 ul

抗戍型肝炎病毒單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株；HEV-4KLKB1/Plasma Kallikrein 1B  血漿激肽釋放酶抗體100µl

小鼠纖維肉瘤細(xì)胞；WEHI-13VARECHS1  烯脂酰輔酶A水解酶抗體100 ul

抗肺炎支原體單克隆抗雜交瘤細(xì)胞株；MP-H5EHHADH  三羥酰輔酶A脫氫酶抗體20 ul

抗克羅特羅毒素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株；CLECM1  細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1抗體100 ul
cGMP elisa試劑盒廠家AMP一磷酸腺苷種屬: Escherichia│coli大腸埃希氏菌DH5α/phGag(1-376)

ADP二磷酸腺苷種屬: Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.平菇?鐘山2號

DPD二氫嘧啶脫氫酶種屬: Metschnikowia│koreensis朝鮮梅奇酵母

DPYD二氫嘧啶脫氫酶種屬: Stemphylium│sp.葡柄霉屬

Dihydroorotate dehydrogenase二氫乳清酸脫氫酶種屬: Agreia│pratensis草地阿格蕾氏菌

dipeptidyl peptldase Ⅳ二肽基肽酶Ⅳ種屬: Wallemia│sebisebi節(jié)擔(dān)菌

Sulfur dioxide二氧化硫種屬: Stigmella│sp.小葉點孢

Thrombospondin type-1 domain-containing protein 7A反應(yīng)蛋白7A域種屬: 畢赤彩虹酵母PichiaPink-1

Pannexin-1 泛連接蛋白1種屬: Monascus│sp.紅曲菌

ubiquitin泛素種屬: Agrocybe│aegerita (V. Brig.) Singer.白茶新菇

Ubiquitin A 52 Residue Ribosomal Protein Fusion Product 1泛素A52殘留核糖體蛋白融合產(chǎn)物1種屬: Auricularia│auricula (Hook. f.) Underw.黑木耳(8808)

biquitin carboxyl-terminal esterase L1泛素C末端水解酶L1種屬: Agaricus blazei Murrill姬松茸（斜面）

ubiquitin D泛素蛋白D種屬: Pisolithus│tinctorius (Pers.) Coker & CouchPt彩色豆馬勃11-2

 Ubiquitin Protein Ligase泛素連接酶種屬: Pseudomonas│solanacearum (Smith) Smith青枯假單孢桿菌

Aromatase芳香化酶種屬: Pseudochrobactrum│asaccharolyticum不解糖假蒼白桿菌
操作流程如下：
（1）僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。