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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>進(jìn)口elisa試劑盒>>人elisa試劑盒>> 48T/96TTFPI elisa試劑盒說明書
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時(shí);
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時(shí);
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
公司采用的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無效包退包換,公司提供免費(fèi)代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱 | TFPI elisa試劑盒說明書 |
英文名稱 | TFPI elisa Kit |
貨號(hào) | GOY-H7631 |
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樣品收集、處理及保存:
1).細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測吸光值。
小鼠抗人IgA雜交瘤細(xì)胞;mAbhIgA-494phospho-Dnmt1(Ser732) 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體100 ul
小鼠抗人IgA雜交瘤細(xì)胞;mAbhIgA-495phospho-Dnmt1(Tyr399) 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體100 ul
小鼠抗人IgE雜交瘤細(xì)胞;mAbhIgE-496phospho-Dnmt1(Tyr969) 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體100 ul
小鼠抗人IgE雜交瘤細(xì)胞;mAbhIgE-497Dnmt3a DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α抗體20 ul
小鼠抗人IgE雜交瘤細(xì)胞;mAbhIgE-498TAG1/CNTN2 瞬時(shí)表達(dá)軸索糖蛋白1抗體100 ul
小鼠抗人IgE雜交瘤細(xì)胞;mAbhIgE-499ADAM12/MLTN 去整合素樣金屬蛋白酶12抗體100 ul
小鼠抗人IgE雜交瘤細(xì)胞;mAbhIgE-500Dnmt3 Beta DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3β抗體100 ul
小鼠抗人IgE雜交瘤細(xì)胞;mAbhIgE-501DNAPK/PRKDC DNA依賴蛋白激酶催化亞基抗體20 ul
小鼠抗人IgG雜交瘤細(xì)胞;mAbhIgG-502DNPK1 DNA依賴蛋白激酶催化亞基抗體100 ul
小鼠抗人IgG雜交瘤細(xì)胞;mAbhIgG-503DOG-1/TMEM16A 跨膜蛋白16A/鈣激活氯離子通道抗體20 ul
小鼠抗人IgA雜交瘤細(xì)胞;mAbhIgA-504DOK1 D酪氨酸激酶衰減蛋白1抗體500 ul
小鼠抗螨P1雜交瘤;mAbmites-505phospho-DOK1(Tyr362) 磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白1抗體500 ul
小鼠抗螨P1雜交瘤;mAbmites-506phospho-DOK1 (Tyr398) 磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白1抗體100 ul
小鼠抗天花粉蛋白雜交瘤;mAbTCSIgG-507DOK2 D酪氨酸激酶衰減蛋白2抗體1 Kit
小鼠抗天花粉蛋白雜交瘤;mAbTCSIgG-508Phospho-p56Dok2(Tyr351) 磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2抗體200 ul
小鼠抗人IgE雜交瘤細(xì)胞;mAbhIgE-509Phospho-p56Dok2(Tyr299) 磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2抗體100 ul
小鼠抗人IgE雜交瘤細(xì)胞;mAbhIgE-510Phospho-p56Dok2(Tyr142) 磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2抗體100 ul
小鼠抗人IgE雜交瘤細(xì)胞;mAbhIgE-511DP1/TFDP1 轉(zhuǎn)錄因子DP1抗體100 ul
TFPI elisa試劑盒說明書IA-2蛋白酪氨酸磷酸酶種屬: Pestalotiopsis│calabae胡桐擬盤多毛孢
protein tyrosine phosphatase蛋白酪氨酸磷酸酶種屬: Phaeosphaeria│sp.暗球腔菌屬
protein tyrosine phosphatase 1B蛋白酪氨酸磷酸酶1B種屬: Apiospora│sp.梨孢假殼菌
Protein phosphatase蛋白磷酸酶種屬: Phytophthora│nicotianae Breda de Haan茄子霉疫
Protease Activated Receptor 4蛋白酶激活受體4種屬: Pichia│burtonii畢赤酵母(加詞待譯)
protein disulfide isomerase蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶種屬: Micromonospora│sp.FIM98-0084小單孢菌FIM98-0084
Concanavalin A刀豆素A種屬: Pholiota│adiposa (Batsch) P. Kumm.黃銹傘
Immunoglobulin A低半乳糖化IgA種屬: Colletotrichum│sp.炭疽菌屬
low molecular weight heparin低分子肝素種屬: Salmonella│corrallis科瓦利斯沙門氏菌
Low Density Lipoprotein低密度脂蛋白種屬: Thermoanaerobacter│mathranii馬瑞氏熱厭氧桿菌
low-density-lipoprotein cholesterol低密度脂蛋白膽固醇種屬: Escherichia│coli大腸埃希氏菌DH5α/pLuc-MHR-P6
Low Density Lipoprotein Receptor低密度脂蛋白受體種屬: Lepiota│cristata (Bolton) P. Kumm.冠狀環(huán)柄菇
low-density lipoprotein-receptor-related protein 1低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1種屬: Colletotrichum│acutatum J.H. Simmonds尖孢炭疽菌
low-density lipoprotein-receptor-related protein 4低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4種屬: Valsa│mali Migabe & G. Yamada蘋果腐爛
low-density lipoprotein-receptor-related protein 5低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5種屬: Diplocarpon│mali Y. Harada & Sawamura蘋果盤二孢
操作步驟:
1)運(yùn)用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時(shí)參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來定,能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
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