當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>維生素系列>> 維生素B6微量法檢測試劑盒
貨號 | GOY-01S6992 |
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商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 100管/96樣 |
檢測方法 | 微量法 |
貨號 | GOY-01S6992 |
商品介紹:
測定意義
維生素B6(Vitamin B6)又稱吡哆素,其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺,在體內(nèi)以磷酸酯的形式存在,是一種,在細(xì)胞中參與多種蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝,對生物體具有極其重要的作用。
測定原理
VB6與4-氨基林在強(qiáng)氧化劑作用下生成穩(wěn)定的黃色化合物,在390nm有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、研缽、離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
4號染色體開放閱讀框28抗體Human SLC25A4(ADP/ATP translocase 1) ELISA Kit纖維素透析袋
陽離子通道相關(guān)蛋白2抗體Human PLEKHO1(Pleckstrin homology domain-containing family O member 1) ELISA Kit硬酯酸甲酯
陽離子通道相關(guān)蛋白3抗體Human GALC(Galactocerebrosidase) ELISA Kit趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒,
液泡蛋白分選蛋白VPS13A抗體Human FAM214A(Protein FAM214A) ELISA Kit人β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒,β-EP ELISA kit
鈣調(diào)B相關(guān)蛋白2抗體Human SERPINB13(Serpin B13) ELISA Kit人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)ELISA試劑盒,sTfR ELISA kit
CHRAC1蛋白抗體Human PTGDR(Prostaglandin D2 receptor) ELISA Kit人腺病抗原(ADV-Ag)ELISA試劑盒,ADV-Ag ELISA
ATP依賴的解螺旋抗體Human ABCA7(ATP-binding cassette sub-family A member 7) ELISA Kit人抗呼吸道合胞病抗體(RSV)ELISA試劑盒,RSV ELISA
X染色體開放閱讀框6抗體Human TCF3(Transcription factor E2-alpha) ELISA Kit人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA試劑盒,CP ELISA
維生素B6微量法檢測試劑盒裸鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
大鼠心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)免疫試劑盒*直銷
大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)免疫試劑盒*直銷
14-3-3 蛋白 beta/alpha(YWHAB)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
αL巖藻糖苷(AFU)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
山羊血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
綿羊環(huán)腺苷(cAMP)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
s腺苷同型半胱(SAH)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
大鼠腺病毒抗體(FL/K87-Ab)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
成纖維細(xì)胞生長因子21(FGF21/UNQ3115/PRO10196)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
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