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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氨基酸代謝系列>> 氨基酸(AA)含量測(cè)試盒可見分光光度法
貨號(hào) | BJ-01611117-2 |
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優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
氨基酸(AA)含量測(cè)試盒可見分光光度法 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-01611117-2 |
商品介紹:
測(cè)定意義 動(dòng)物肝臟、腎臟是氨基酸代謝的主要器官,故尿中氨基酸的變化最能反應(yīng)肝、腎的生理狀態(tài)。植物體內(nèi)氨基酸含量對(duì)研究植物在不同條件下及不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期氮代謝變化、植物對(duì)氮素的吸收、運(yùn)輸、同化及營(yíng)養(yǎng)狀況等有重要意義。另外,氨基酸還能反應(yīng)灼傷、傷寒等方面情況。 測(cè)定原理 氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)紫色化合物,其顏色的深淺與氨基酸的含量成正比。 需自備儀器及用品 95%乙醇,研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1ml玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、雙蒸水,水浴鍋,10ml帶蓋試管或EP管。 |
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
血管組織血管緊張suⅡ1型受體抗原立枯絲核菌五指毛桃Radix Fici simplicissimae
馬勃狀硬皮馬勃金毛耳草(黃毛耳草)Golden?ear
芳香烴受體抗原矩圓黑盤孢乙Acetonitrile
Fe65 蛋白(多肽抗原)釀酒酵母川燈心草Sichuan?rushes
肝su結(jié)合生長(zhǎng)因子(性成纖維生長(zhǎng)因子)(多肽片斷抗原)釀酒酵母二甲基亞砜Two methyl?sulfoxide
原酶 (又稱:纖維介su蛋白;前凝血su)蘋果雙殼菌*香櫞(枸櫞)Citron?(Gou Yuan)
凋亡調(diào)節(jié)基因之一(多肽抗原)佛雷德里克斯堡假單胞菌葶藶子(獨(dú)行菜)Semen Lepidii?(Lepidium)
叉頭蛋白3-T轉(zhuǎn)錄因子(多肽抗原)簡(jiǎn)單芽孢桿菌麥白霉suMeleumycin
生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43(抗原)穎苞莖點(diǎn)霉威靈仙(綿團(tuán)鐵線蓮)Clematis?(Clematis?woolly?group)
胃泌su(抗原)炭黑曲霉瓜蔞(栝樓)Trichosanthes?(Trichosanthes kirilowii Maxim
α-甲基?;鵩u酶A消旋酶抗原貝葉多孔菌卡那霉suKanamycin
膠質(zhì)纖維酸性蛋白(抗原)細(xì)鏈格孢印度獐芽菜India?Swertia japonica
腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗原積磷小月菌絡(luò)石藤Luo Shiteng
基質(zhì)金屬蛋白mei-1麥根腐平臍蠕孢阿里紅Ali red
基質(zhì)金屬蛋白mei-2(多肽抗原)淡紫擬青霉貓爪草Cat's claw
氨基酸(AA)含量測(cè)試盒可見分光光度法蛋白mei激活受體2(PAR2)試劑盒Anti-IRS1 Antibody磷酸化微管相關(guān)蛋白
生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白14(Grb14)試劑盒Anti-IRS2 Antibody磷酸化微管相關(guān)蛋白
顆粒酶K(GZMK)試劑盒 Anti-ISG15 Antibody脫氫膽固還原酶14
克拉拉蛋白(CC16)試劑盒 Anti-ISL1 Antibody甲狀腺su結(jié)合球蛋白
補(bǔ)體因子I(CFI)試劑盒Anti-ITGA1 Antibody轉(zhuǎn)導(dǎo)suβ1X連鎖蛋白
粘蛋白3(MUC3)試劑盒Anti-ITCH Antibody內(nèi)皮suB受體
細(xì)絲蛋白Cγ(FLNC)試劑盒Anti-ITCH/AIP4 Antibody轉(zhuǎn)導(dǎo)suβ1X連鎖受體蛋白1
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