當(dāng)前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>PCR基因檢測試劑盒>>GMO轉(zhuǎn)基因元件檢測>> 50次轉(zhuǎn)基因元件CaMV35終止子染料法qPCR試劑盒
【運輸及保存】
產(chǎn)品僅用于科研低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
【自備試劑】
一管式病毒 RANout 或柱式病毒 RNAout
【使用方法】
一、樣品 RNA 的制備
用自選方法純化 EMCV 樣品的 RNA ,也可以另購本公司的一管式病毒RANout 或柱式病毒 RNAout,上述兩款產(chǎn)品跟本試劑盒兼容。
二、陽性對照
為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA 段作為陽性對照。使用本陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分 在專門的區(qū)域操作。 ?
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50次 |
貨號 | BJP7027 |
訂購流程:
通過在線客服咨詢產(chǎn)品→確定產(chǎn)品→提供單位收貨信息→確立合同→安排發(fā)貨。
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實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。好設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
【參考值(參考范圍)】
1.試劑盒有效性判定:
(1)陽性對照:有典型S型擴增曲線或Ct值≤35。
(2)陰性對照:Ct值>38或無Ct值,線形為直線或輕微斜線,無指數(shù)增長期。
2.標(biāo)本結(jié)果判定:
(1)陽性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期。
(2)可疑:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值在35~38范圍內(nèi)。此時應(yīng)對標(biāo)本進行重復(fù)檢測,如重復(fù)實驗結(jié)果Ct值仍在35~38范圍內(nèi),有明顯指數(shù)增長期,則判定為陽性,否則為陰性。
(3)陰性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值>38或無Ct值。
CCDC85B 英文名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白85B抗體 0.2ml
Anti-Calmodulin/CAM 鈣調(diào)節(jié)素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
RRAD (Ras-related associated with diabetes ) RRAD(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CD74/MHC II CD74抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Oxytocin R 催產(chǎn)素受體(縮宮素受體)抗體 規(guī)格 0.1ml
IGFBP3 Kit Human 人 IGFBP3 ELISA配對抗體 ELISA
TCR alpha 英文名稱: T淋巴細胞受體α抗體 0.2ml
Annexin V 英文名稱: 膜粘連蛋白5抗體 0.1ml
Anti-Bad/FITC 熒光素標(biāo)記相關(guān)死亡促進因子Bad抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
IL-6 ELISA KIT 大鼠白介素6Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-Bad(Ser112) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化相關(guān)死亡促進因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ETS1 associated protein II/EAPII ETS1相關(guān)蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml
BMP-4(Mouse Bone morphogenetic protein 4) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白4 96T
Phospho-MYPT1 (Ser668) 英文名稱: 磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗體 0.1ml
轉(zhuǎn)基因元件CaMV35終止子染料法qPCR試劑盒組織PKCθ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)Rat angiotension I ELISA KitC21H22O5
組織PKCι激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)Rat DPP4 ELISA KitC32H44O8
組織PKC激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)Rat Myosin ELISA KitC6H6O3
組織PKD2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)Rat C5a ELISA KitC19H26O12
組織PKG-II激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)Rat Glycogen phosphorylase II ELISA KitC30H50O
組織PKG-Iα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)Rat PCNA ELISA KitC17H14O6
組織PKG-Iβ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)Rat tartRate-resistant acid phosphatase orm 5b ELISA KitC24H32O7
組織PKG-I激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)Rat E-Selectin ELISA kitC8H10N4O2
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