當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>PCR相關試劑>>恒溫擴增系列>> HotStart Bst 4.2 Basic Mix(可凍干)
貨號 | A-PJ1014 | 分類 | 恒溫擴增系列 |
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規(guī)格 | 200Tx25μl | 品牌 | 撫生 |
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
產(chǎn)品介紹:
HotStart Bst 4.2 Basic Mix(可凍干)
描述:
2.5xBst4.2 Basic Mix 包含了 Helicaser、dNTP、Mg2+、反應緩沖鹽、凍干賦形劑和穩(wěn)定劑。HotStart Bst4.2DNA/RNA 聚合酶為單獨的組分。本品不僅可作為常規(guī)檢測試劑,對于具有凍干經(jīng)驗的研究者,
本品還直接進行后續(xù)凍干,無需再加入任何其它輔料。
Bst4.2 具有以下性能:
(1)Bst 4.2 全系包含熱啟動Aptamer,該配體確保酶在<30℃時,酶活封閉效率>95%,在>60℃時 1min 內(nèi)釋放酶活。該特性利于室溫建立反應體系,并大幅降低了低溫條件下的非特異擴增;
(2)反應溫度提升到 70℃,大幅降低引物 Dimer 的形成,提高擴增特異性,并使得粗樣品核酸釋放更加充分;
(3)全系包含 Helicaser,因此,允許在不使用 F3/B3 引物的情況下進行 LAMP 擴增(easy LAMP),并允許 FIP/BIP 的引物用量降低一倍。這將進一步降低非特異擴增,并使得擴增均一性大幅提升。本品為多用途的試劑,適用于 LAMP 進行 MolecularBeacon 探針、DP-LAMP 探針、試紙條等檢測。
儲存:長期保存請置于-20℃以下(12 個月有效);制品反復凍融10 次不影響性能,但應避免反復凍融;制品由于含有高濃度的糖組分,-20℃保存的制品,在融化時可能會有結晶物。此時 2.5xBst4.2Mix 可在 37℃進行融化,而 Bst4.2 酶制品在 30℃的溫度下融化,過高的溫度可能會導致熱啟動性能下降。一經(jīng)融化推薦置于2-8℃保存,在此條件下制品穩(wěn)定儲存 6 個月。
特殊說明:
(1) Bst4.2 DNA/RNA Polymerase 在用于 LAMP 擴增時的推薦反應溫度為 65-70℃,最佳反應溫度為 70℃。因此其可替代 的 Bst4.0 系列,用于標準 LAMP 的擴增。
(2) 由于 Helicaser 的反應溫度為 70℃,因此在進行 eLAMP 擴增時,反應溫度為 70℃。
(3) 制品中包含高濃度的鹽組分,使用時做好個人防護,防止制品與皮膚、眼、鼻、呼吸道等接觸和吸入,一旦接觸或吸入,請用大量的清水沖洗。
(4)防止氣溶膠污染,盡可能進行分區(qū)操作。
1. 標準 LAMP 和 eLAMP 擴增的區(qū)別本試劑既可以用于標準 LAMP 擴增,也可以用于 eLAMP擴增。
1.1 10x 標準 LAMP Primer MixFIP/BIP=16 μM each; LF/LB=4 μM each; F3/B3=2 μM each
1.2 10xeLAMP Primer MixFIP/BIP=8 μM each; LF/LB=4 μM each
注意:eLAMP(easy LAMP)為去除 F3/B3 引物的方法,為 Bst4.2系列專用的使用策略,對于大多數(shù)引物組,在 Helicaser 的加持下,擴增速度幾乎不受影響。如引物擴增效率低,可提高 FIP/BIP 濃度到 12~16uM。
1.3 擴增溫度不同標準 LAMP 擴增 eLAMP 擴增65-70°C 均可 70°C 反應
2. 配制 LAMP 反應體系
2.5xBst4.2 Basic Mix 10 μl
10x Primer Mix 2.5 μl
HotStart Bst 4.2(8U/μl) 1 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到總體積 25 μl
反應體系配好后,置于 65-70°C 反應 20~30min。
3. 試劑的凍干反應(僅限專業(yè)人員)本試劑可供具有凍干經(jīng)驗的人員直接進行后續(xù)凍干,試劑的配方對凍干條件不苛刻。但對于不同的用戶來講,由于凍干形式、凍干體積、上機量、凍干容器、凍干磨具等因素存在差異,以下程序僅供參考。進一步的程序優(yōu)化均需根據(jù)具體情況自行調(diào)整。對于非專業(yè)人員來講,請直接采購 的凍干制品,或委托訂制。
2.5xBst4.2 Basic Mix 10 μl
25xPrimer Mix 1 μl
HotStart Bst 4.2(8U/μl) 1 μl
Total 12 μl
制品成型后的凍干程序:
-50℃預凍 10min; -50℃ 4-8h(真空段);-50℃升溫到 25℃(每小時升溫 5℃);25℃ 2h; 25℃恒溫。
公司正在出售的產(chǎn)品:
促代謝型受體6封閉多肽 | 木蝴蝶染料法PCR鑒定試劑盒 |
梅恩君病毒RT-PCR試劑盒 | 表達于SiSo細胞系的受體結合型腫瘤抗原ELISA試劑盒 |
人chemerin ELISA檢測試劑盒 | 半乳糖-3-O-磺基轉移mei2ELISA試劑盒 |
人黑色su瘤相關抗原D4(MAGED4/MAGED4B)ELISA試劑盒 | 封閉蛋白19ELISA試劑盒 |
人β葡萄糖醛suan苷mei(βGD)試劑盒elisa | 半蛋白mei抑制劑2ELISA試劑盒 |
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苦堿型鋅指蛋白5封閉多肽 | 牛巴氏桿菌PCR檢測試劑盒 |
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BK通道蛋白多肽多肽 | 淋球菌PCR檢測試劑盒 |
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B和T淋巴細胞衰減蛋白封閉多肽 | 口蹄疫O型/A型/Asia1型(FMDV-O/-A/-Asia1)核suan檢測試劑盒 |
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磷suan化微管相關蛋白封閉多肽 | 柯拉松血吸蟲PCR試劑盒 |
G蛋白偶聯(lián)受體101封閉多肽 | 口蹄疫病毒A型(FMDV-A)核suan檢測試劑盒 |
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