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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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20min全能基因組DNA提取試劑盒

參  考  價(jià):858
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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    經(jīng)銷商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

50T 858元 15盒可售

更新時(shí)間:2023-11-06 16:38:43瀏覽次數(shù):334次

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貨號(hào) A-PJ1168 分類 核酸純化專題
規(guī)格 50T 品牌 撫生
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公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

產(chǎn)品介紹:

20min全能基因組DNA提取試劑盒該試劑盒采用裂解液,可快速可靠的從動(dòng)物組織、細(xì)胞、細(xì)菌、病毒、全血、血清、血漿、體液、病毒液、棉拭孖等樣品中純化出高純度的 DNA??芍苯佑糜谙拗菩悦盖蟹磻?yīng)、PCR、文庫構(gòu)建、Southern 雜交等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

操作方法:
(一)RNA 含量較高的動(dòng)物組織、細(xì)胞、細(xì)菌樣本的提取方法
(1) 樣品組織懸液的制備:動(dòng)物組織用研缽研磨:將動(dòng)物組織研磨粉碎,并取 40~60 mg 加入到 1.5ml EP 管中,加入 280 μl 無菌水,漩渦震蕩 10s混合均勻,打開管蓋加入 50 μl 的 Buffer AP4 裂解液和 5 μl 的 RnaseA,漩渦震蕩 10s 混合均勻,室溫消化 5min,以去除RNA。動(dòng)物組織用鋼珠研磨:取 50~80 mg 組織加入到 400 μl 無菌水,在研磨儀上研磨 1min。在 1.5 ml EP 管底部加入 50 μl 的Buffer AP4 裂解液,并在管蓋上加入 5 μl 的 RnaseA,取 280 μl 研磨好的組織懸液到 1.5 ml EP 管中,漩渦 10s 混合均勻,室溫消化 5min,以去除 RNA。懸浮的細(xì)胞(104~108 個(gè))或細(xì)菌(106~1011 個(gè)):在 1.5 ml EP 管底部加入 50 μl 的 Buffer AP4 裂解液,并在管蓋上加入5 μl 的 Rnase A,直接吸取 280 μl 樣品到上述 EP 管中,漩渦震蕩 10s 混合均勻,室溫消化 5min,以去除 RNA。細(xì)胞或細(xì)菌沉淀:可用 280 μl 無菌水重懸細(xì)胞和細(xì)菌沉淀,并加入 50 μl 的 Buffer AP4 裂解液和 5 μl 的 RnaseA,漩渦震蕩 10s 混合均勻,室溫消化 5min,以去除 RNA。
(2)RNA 消化完畢后,向上述溶液中加入 20 μl 的蛋白酶 K,漩渦 10s 混合均勻,并置于 56℃水浴鍋(或室溫條件下)中消化 5min。
(3)消化完畢后,向上述溶液中加入 500 μl 的 Buffer LB5,漩渦混合 15s 后,13000rpm 最高轉(zhuǎn)速離心 2min。將上清液倒入到吸附柱中。
(4)13000rpm 離心 1min,棄過柱液。向吸附柱中加入 500 μl 的 Washing Buffer,13000rpm 離心 15s。棄過柱液,并重復(fù)此步驟一次。
(5)將吸附柱重新放回離心機(jī),13000rpm 空離心 2min,將殘留的乙醇甩干。
(6)將吸附柱芯放入到 1.5 ml 收集管中,向吸附柱芯中加入 60~150 μl DNA Elution Buffer,室溫放置 1min,13,000rpm離心 2min,洗脫液即為基因組 DNA,冷凍保存。
(二)RNA 含量較低的樣本(全血、血清、血漿、體液、病毒液、棉拭孖浸泡液等)的提取方法在 1.5 ml EP 管底部預(yù)先加入 50 μl 的 Buffer AP4 裂解液,在管蓋上加入 20 μl 的蛋白酶 K,直接吸取 280 μl 的液體樣本到 Buffer AP4 裂解液中。上下顛倒,并漩渦混合 10s,使得樣品、Buffer AP4 裂解液、蛋白酶 K 混合均勻,并置于 56℃水浴鍋中(或室溫)消化 5min。按照上述步驟(3)-(6)進(jìn)行上柱、漂洗、洗脫操作。


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