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細(xì)胞系

連接天然免疫和獲得性免疫的炎癥小體

時(shí)間:2019-3-18閱讀:318
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炎癥小體是由細(xì)胞質(zhì)傳感器,細(xì)胞凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白(ASC;或PYCARD)和pro-caspase-1組成的三體復(fù)合物。傳感器的多樣性和特異性賦予其對(duì)外源(微生物)或內(nèi)源(壓力信號(hào),警報(bào)素)等各種刺激的響應(yīng)。傳感器包括NLRP1,NLRP3和NLRC4(屬于NOD樣受體家族),AIM2(absent in melanoma-2)或Pyrin。
進(jìn)口elisa試劑盒多樣性和特異性的傳感器可以廣泛識(shí)別外源性(微生物分子)和內(nèi)源性(危險(xiǎn)信號(hào))刺激物。

研究為透徹的炎癥小體代表是NLRP3炎癥小體。其活化分兩步:個(gè)信號(hào)(Priming)觸發(fā)NF-κB依賴的pro-IL1β和NLRP3表達(dá),第二個(gè)信號(hào)由不同結(jié)構(gòu)的微生物分子(例如“毒素”)或危險(xiǎn)信號(hào)(尿酸單鈉,MSU)觸發(fā)炎癥小體多聚體形成。NLRP3誘導(dǎo)ASC活化并形成斑點(diǎn),進(jìn)而促使caspase-1自我切割并活化?;罨腸aspase-1促使IL-1β和IL-18水解成熟;并且促使Gasdermin D(GSDMD)切割。切割的GSDMD隨后在細(xì)胞膜上形成孔,引發(fā)促炎性細(xì)胞死亡,即細(xì)胞焦亡(Pyroptosis)。這個(gè)過程伴隨著IL-1β,IL-18和警報(bào)素如HMGB1的釋放,將危險(xiǎn)信號(hào)從受損或死亡的細(xì)胞傳播出去并調(diào)動(dòng)免疫細(xì)胞,特別是體現(xiàn)在中性粒細(xì)胞的招募2,3。此外,寡聚炎性體顆粒可通過吞噬作用(phagocytosis)被周圍巨噬細(xì)胞吞噬進(jìn)而放大炎癥反應(yīng)4。

 炎癥小體依賴性IL-1β分泌,可驅(qū)動(dòng)Th17應(yīng)答,對(duì)于防御真菌感染起到重要作用。通過C-型凝集素受體如Dectin-1識(shí)別Candida albicans等真菌抗原的特定結(jié)構(gòu)(β-glucans)可導(dǎo)致Syk依賴性NF-κB的激活,NLRP3炎癥小體組裝和IL-1β驅(qū)動(dòng)的Th17細(xì)胞應(yīng)答9,10。值得注意的是,Dectin-1信號(hào)通路還可通過非經(jīng)典的caspase-8炎癥小體觸發(fā)產(chǎn)生IL-1β9。

IL-1β和IL-18在獲得性免疫中的不同功能,使炎癥小體在疫苗佐劑的應(yīng)用研究中備受關(guān)注?;罨装Y小體的配體可調(diào)控Th1型體液免疫應(yīng)答,Th1、Th17、細(xì)胞毒性T細(xì)胞免疫和免疫記憶11。例如,由于I型干擾素(IFNs)可以抑制pro-IL-1合成,但促進(jìn)IL-18成熟,所以將IFN與炎癥小體活化的DC混合,有希望保護(hù)Th1型應(yīng)答11。近研究發(fā)現(xiàn),誘導(dǎo)I型干擾素的產(chǎn)生和NLRP3炎癥小體的活化可增強(qiáng)Th1型應(yīng)答13。

隨著對(duì)炎癥小體生物學(xué)機(jī)理的全面解析不斷深入,如何平衡選擇在有害和有益的炎癥小體激活之間切換,是未來優(yōu)化治療方案不得不考慮的課題。

1.elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中樣品都要做復(fù)孔或三孔,然后計(jì)算每個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值,復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。

 2.平均OD值減去空白孔的OD值。
有趣的是,在吞噬細(xì)胞處于“超活化(Hyperactivation)“狀態(tài)時(shí),IL-1β的分泌可獨(dú)立于細(xì)胞焦亡的發(fā)生5,6。事實(shí)上,炎癥小體誘導(dǎo)樹突細(xì)胞(DCs)超活化,后者觸發(fā)增強(qiáng)T細(xì)胞(enhanced T cell)應(yīng)答:除保留其功能和抗原遞呈外,增強(qiáng)T細(xì)胞促使微環(huán)境中的輔助T細(xì)胞(T helper)做出反應(yīng)并分泌IL-1β和IL-18。這些細(xì)胞因子優(yōu)動(dòng)Th1、Th17應(yīng)答。IL-18可通過活化的Th1細(xì)胞誘導(dǎo)IFN-γ產(chǎn)生,IL-1β可穩(wěn)定Th17細(xì)胞的分化,進(jìn)而產(chǎn)生IL-17。此外,IL-1β也可提高初始T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞的存活7,8。

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